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本文以梨砧木种子为试材,研究了种子的外观形态特征、生活力、种子贮藏、种子老化特性和打破种子休眠的方法等,主要结果如下:
1. 不同种类的梨种子在千粒重、种长、种宽、种厚等方面存在着差异。栽培品种种子的个体比野生砧木的大。测定中国豆梨和榀桴种子生活力时,去种皮种子的染色率显著高于有种皮的。用红墨水法、靛蓝法、I-KI法和TTC法等4种方法测定去种皮的中国豆梨和榀椁种子生活力,以TTC法的染色率最高。去种皮的中国豆梨种子,在30℃、0.9%TTC和7h下,可获得最佳染色效果;而去种皮的榅桲种子,则在30℃的、0.9%TTC和8 h下,可获得最佳染色效果。
2. 与常温贮藏条件相比,杜梨、中国豆梨、榅桲和砀山酥梨等种子在4℃低温密封条件下贮藏1年的活力分别高69.01%、61.55%、59.67%、61.69%;种子内可溶性糖含量分别增加11.72μg/ g、12.77μg/ g、12.24μg/ g、15.58μg/ g;可溶性蛋白质含量分别增加44.58 mg/g、43.10 mg/g、41.98 mg/g、58.56 mg/g;SOD活性分别减少36.69 U/(g·min),50.02 U/(g·min)、44.32 U/(g·min)、62.86 U/(g·min);POD活性分别减少52 U/(g·min)、54 U/(g·min)、46.09 U/(g·min)、54.20 U/(g·min);CAT活性分别减少32.58 U/(g·min)、31.66 U/(g·min)、27.86 U/(g·min)、41.74 U/(g·min);MDA含量分别降低40.42μmol/mg、27.55μ mol/mg、46.9μ mol/mg、46.41μ mol/mg。这些结果表明,在4℃低温条件下贮藏1年的种子,其活力、贮藏物质(可溶性糖和可溶性蛋白质)含量和保护酶系统(SOD、POD和CAT)活性均显著高于自然贮藏的种子,而MDA含量显著地低于自然密封贮藏的种子。说明4℃低温贮藏条件可以延长种子活力,是一种较为理想的种子贮藏方法。
种子在高温高湿贮藏条件下进行,随贮藏时间的延长,种子发芽率显著下降;贮藏60 d时,梨砧木种子的发芽率几乎为零;而细胞凋亡率却相反,一直呈上升趋势。对高温诱导的种子进行组织染色发现,膜脂过氧化和质膜完整性破坏的程度和分布范围都随着胁迫时间的延长而逐渐加重和扩大。杜梨、中国豆梨、楹椁和砀山酥梨等种子分别在30 d、30 d、35 d和40 d时,O2-产生速率减慢、H2O2含量下降,TUNEL染色结果表明,此时DNA已断裂;DAPI染色后发现种子细胞经历了细胞染色质凝集、细胞核缩小、变形、解体等,这些特征充分证明种子老化死亡过程出现了PCD现象。
3. 4种种子在去皮黑暗25℃条件下萌发较好。IAA、GA、BA能打破种子休眠,激素对去种皮的种子效果明显,无种皮未层积的和有种皮层积的种子经激素处理后,其发芽率接近。去皮的杜梨、中国豆梨、砀山酥梨和楹椁等种子分别以150mg/LIAA和BA、250mg/L BA、150mg/L IAA和250 mg/LBA处理为佳。与对照相比,H2O2提高了有种皮的梨砧木种子发芽率,最高萌发率低于10%0.6%KNO3、20%PEG-6000和0.8%H3BO3显著提高了无种皮梨砧木种子的发芽率,其处理的种子发芽率均高于80%。0.6%KNO3、20%PEG-6000和0.8%H3BO3能部分解除有种皮梨砧木种子的休眠,其发芽率低于20%.
4. 层积前最佳浸种时间为1 h。通过低温层积能够提高梨砧木种子的发芽率,且随着时间的延长,种子发芽率越高。杜梨和中国豆梨种子分别在层积40 d和50 d时达到发芽高峰;而楹椁和砀山酥梨种子层积至60 d时,其发芽率仍然不高。梨砧木种子在层积过程中,可溶性蛋白质含量减少,可溶性糖和氨基酸含量明显增加,但杜梨和中国豆梨种子的可溶性糖和氨基酸含量均呈先上升后下降趋势,POD和CAT的活性呈增加的趋势,其中杜梨和中国豆梨种子的CAT活性呈现出先增加后下降的趋势。IAA、GA与ABA的表现相反,种子层积0 d时,ABA含量最高,而IAA和GA含量较低,种子层积60d时,ABA含量急剧下降而IAA和GA含量上升。
5. SNP能有效地解除杜梨种子休眠,防止畸形苗的出现。0.8%SNP处理的杜梨种子发芽率最高,为80%。SNP处理增加了保护酶活性、GA和IAA含量,降低了ABA含量。与对照相比,最高POD、CAT和SOD等的活性分别出现在第8天、第6天、第8天,分别增加了41.85、89.58、110.7 U/(g·min)。最高GA和IAA含量分别出现在第6天和第8天,各自增加了39.72、32.36 ng/g。清水浸种时,种皮中ABA的含量减少而种仁中的却增加。杜梨种子经0.8%SNP浸种处理后,种皮和种仁中的ABA含量显著下降。