禹州漏芦化学成分及其生物活性研究

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禹州漏芦(Radix Echinopsis)为菊科蓝刺头属植物蓝刺头Echinops latifolius Tausch的干燥根,主产于我国东北、华北及西北地区。禹州漏芦作为一种传统中药,在1995年前一直与祁州漏芦混用,均称漏芦,直至1995年《中华人民共和国药典》(1995年版)将二者分开收录,分别命名为漏芦和禹州漏芦。禹州漏芦味苦、性寒、归胃经,具有清热解毒、排脓止血、消痈下乳的功效,用于治疗诸疮痈肿,乳痈肿痛,乳汁不通,瘰疬疮毒等症。从禹州漏芦95%乙醇提取物中,利用系统溶剂萃取法、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、制备型TLC等手段分离得到39个化合物。根据理化常数测定,化学方法和光谱数据分析(1D-NMR、2D-NMR、MS等)鉴定了它们的结构,这些化合物分属于噻吩类、三萜类、甾体类、芳香类、有机酸类及酯类、糖类等。分离鉴定的39个化合物分别为噻吩类:α-三联噻吩[α-terthienyl,1],5-(丁烯-3-炔-1)-2,2′-联噻吩[5-(but-3-en-1-ynyl)-2,2′-bithiophene,2],卡多帕亭[cardopatine,3],异卡多帕亭[isocardopatine,4],5-(4-异戊酰氧基丁炔-1)-2,2′-联噻吩[5-(4-isovaleroyloxybut-1-ynyl)-2,2′-bithiophene,5],5-(3-乙酰氧基-4-异戊酰氧基丁炔-1)-2,2′-联噻吩[5-(3-acetoxy-4-isovaleroyloxybut-1-ynyl)-2,2′-bithiophene,6],5-(3-羟基-4-异戊酰氧基丁炔-1)-2,2′-联噻吩[5-(3-hydroxy-4-isovaleroyloxybut-1-ynyl)-2,2′-bithiophene,7],5-(3-异戊酰氧基-4-羟基丁炔-1)-2,2′-联噻吩[5-(3-isovaleroyloxy-4-hydroxybut-1-ynyl)-2,2′-bithiophene,8],echinoetherthiophene[5-{4-[4-(5-pent-1,3-diynyl-thiophen-2-yl)-but-3-ynyloxy]-but-1-ynyl}-2,2′-bithiophene,9],5-(4-羟基丁炔-1)-2,2′-联噻吩[5-(4-hydroxybut-1-ynyl)-2,2′-bithiophene,10],5-(3,4-二羟基丁炔-1)-2,2′-联噻吩[5-(3,4-dihydroxybut-1-ynyl)-2,2′-bithiophene,11],5-(4-羟基丁酮-1)-2,2′-联噻吩[5-(4-hydroxybut-1-one)-2,2′-bithiophene,12],5-乙酰基-2,2′-联噻吩[5-acetyl-2,2′-bithiophene,13],5-氨甲酰基-2,2′-联噻吩[5-carbamoyl-2,2′-bithiophene,14],2-(戊二炔-1,3)-5-(4-羟基丁炔-1)-2,2′-噻吩[2-(pent-1,3-diynyl)-5-(4-hydroxybut-1-ynyl)-thiophene,15],2-(戊二炔-1,3)-5-(3,4-二羟基丁炔-1)-2,2′-噻吩[2-(pent-1,3-diynyl)-5-(3,4-dihydroxybut-1-ynyl)-thiophene,16]。三萜类:蒲公英萜醇乙酸酯[taraxerol acetate,17],木栓酮[friedelin,18],熊果酸[ursolic acid,19]。甾体类:过氧化麦角甾醇[ergosterol peroxide,20],9(11)脱氢过氧化麦角甾醇[9(11)dehydro-ergosterol peroxide,21],豆甾-5,22-二烯-3β-醇-7-酮[stigmast-5,22-dien-3β-ol-7-one,22],豆甾-4-烯-3β,6β-二醇[stigmast-4-ene-3β,6β-diol,23],α-菠菜甾醇[α-spinasterol,24],β-谷甾醇[β-sitosterol,25],胡萝卜苷[daucosterol,26]。芳香类:酪醇[tyrosol,27],对羟基苯甲酸[4-hydroxy-benzoic acid,28],对羟基苯乙酸[4-hydroxyphenylacetic acid,29],对羟基苯乙酸乙酯[4-hydroxyphenylacetic acid ethyl ester,30],原儿茶酸[protocatechuic acid,31],原儿茶酸乙酯[protocatechuic acid ethyl ester,32],香草醛[vanillin,33],香草酸[vanillic acid,34]。有机酸类及酯类:琥珀酸[succinic acid,35],正廿四酸[n-tetracosanoic acid,36],棕榈酸[palmitic acid,37],单硬脂酸甘油酯[glyceryl monostearate,38]。糖类:蔗糖[sucrose,39]。其中化合物8,9,12为未见文献报道的新化合物;化合物14为一新天然产物:化合物4,5,6,7,10,13,15,18,20,21,22,23,24,27,28,29,30,31,32,33,34,35,36,37,38为首次从该植物中分离得到。利用人类慢性骨髓性白血病K562细胞模型,以细胞周期抑制和细胞凋亡诱导活性为筛选指标,对禹州漏芦95%乙醇提取物各萃取部分及70%乙醇提取物进行活性筛选,确定其抗癌活性成分集中于95%乙醇提取物的石油醚萃取部分及氯仿萃取部分。采用MTT法和SRB法,对分离得到的噻吩类成分的体外肿瘤抑制活性进行了初步研究。研究发现测试化合物均显示出光敏活性,对试验细胞系具有明显的依赖于长波紫外光的细胞毒作用。利用文献,从结构类型、植物分布、生合成途径、生物活性及结构研究方法等方面对菊科特有的噻吩类化学成分的研究进展进行了综述。
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