【摘 要】
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谷胱甘肽(GSH)是一种重要的生物活性物质,广泛应用于医药、食品添加剂等领域。微生物发酵法是其主要的生产方式,优良菌株的选育和发酵条件的优化是提高谷胱甘肽产量的主要途
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谷胱甘肽(GSH)是一种重要的生物活性物质,广泛应用于医药、食品添加剂等领域。微生物发酵法是其主要的生产方式,优良菌株的选育和发酵条件的优化是提高谷胱甘肽产量的主要途径。GSH的提取方法主要有:乙醇提取法、热水提取法、甲酸提取法和三氯乙酸提取法,对谷胱甘肽提取方法进行比较后发现,乙醇法是最适的提取方法。GSH的检测方法主要有碘量法、高效液相色谱法、紫外分光光度计法、荧光法和紫外吸收法。对几种检测方法比较后表明,荧光分光光度计法简便、快捷,适于初筛的测定;高效液相色谱法精确、可靠,适于复筛时菌体GSH产量的测定。对出发菌株2.558进行紫外线诱变、紫外线和LiCl复合诱变后、再经放线菌素D抗性筛选后得到突变株F400-1,该突变株谷胱甘肽细胞含量达19.25mg/g,较出发菌株提高了535.31%;谷胱甘肽发酵液含量为106.14mg/L,提高了745.06%。突变菌株经过10次传代实验,具有较好的稳定性。对突变菌株F400-1的发酵条件进行了优化,确定最佳发酵条件为:培养温度30℃,摇床转速180r/min,接种量10%,pH6.0,装液量50mL/250mL,发酵培养时间36h;最佳培养基组成为:葡萄糖40g/L,酵母膏7g/L,(NH4)2SO45g/L, KH2PO48g/L, K2SO4 3.6g/L, MgSO4 1.0g/L, FeSO40.008g/L, MnSO4 0.008g/L,突变株F400-1在优化条件下谷胱甘肽发酵液含量达108.45mg/L。
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