小鼠胚胎紧密化过程中Ezrin的磷酸化调控及囊胚期时Hippo信号通路的调控

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小鼠胚胎植入前发育过程中,从8细胞紧密化到囊胚期时,第一个分化事件为内细胞团(内细胞团)和滋养外胚层(滋养外胚层)的分离。这一分化事件受到多种形式的调控,包括转录活性,表观遗传,microRNA,和信号转导。  之前已有报道表明Ezrin蛋白的T567位点的磷酸化对于8细胞时期的紧密化调控很重要,但具体是由哪个激酶导致其磷酸化的却并不清楚。我们通过体外磷酸化实验确定了免疫纯化的aPKC(atypical Protein Kinase C)能磷酸化Ezrin的T567位点,同时通过显微注射aPKC的siRNA,我们确定了体内Ezrin同样受到aPKC的磷酸化,所以,综合以上,我们认为aPKC便是胚胎紧密化过程的主要激酶。  Hippo信号通路在调控ICM和TE的分化过程中起着重要作用,囊胚期的ICM中缺乏细胞极性以及高度细胞连接导致Hippo通路激活,而在TE中Hippo通路是被抑制的,通过抑制剂处理胚胎,我们首次发现了囊胚期的胚胎中时TE中的RhoA能抑制Hippo通路。显微注射NF2的显性隐性失活(DominantNegative)形式的mRNA会恢复TE中Hippo活性的抑制状态,表明RhoA很有可能是通过NF2来抑制Hippo通路的。
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