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目的：探讨不同剂量甲基转移酶抑制剂地西他滨(decitabine, Aza)通过调节Foxp3基因表达在体内外实验中对CD4+CD25+Treg细胞变化的影响,寻找体内外Aza影响CD4+CD25+Treg变化的合适剂量。方法：(1)体外实验部分,利用密度梯度离心法分离纯化C57BL/6(H-2b)小鼠脾脏单个核细胞,联合使用抗小鼠CD3单克隆抗体、抗小鼠CD28单克隆抗体、IL-2、TGF-β及不同剂量的Aza,进行淋巴细胞培养,观察不同剂量的Aza对培养体系的影响,以流式细胞技术检测培养体系CD4+CD25+Foxp3+Treg比例,实时荧光定量PCR检测培养体系Foxp3mRNA表达水平。(2)体内实验部分,按不同分组经C57BL/6(H-2b)小鼠阴茎背静脉注射不同剂量的Aza,观察不同剂量的Aza对小鼠机体的影响,以流式细胞技术检测外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg比例,实时荧光定量PCR检测脾脏Foxp3mRNA表达水平。结果：(1)体外实验中发现,①联合使用抗小鼠CD3单克隆抗体、抗小鼠CD28单克隆抗体、IL-2. TGF-β及Aza能够使小鼠脾脏淋巴细胞培养体系中初始CD4+CD25-T细胞分化为CD4+CD25+Treg细胞。同时Foxp3mRNA表达水平上升。②不同剂量Aza诱导初始CD4+CD25-T细胞分化为CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的数量不同。Foxp3mRNA表达水平也不同。③浓度为5uM Aza组淋巴细胞培养体系中CD4+CD25+Foxp3+Treg比例和Foxp3mRNA表达水平与其他浓度组相比升高最明显,且差异有统计学意义(P<0.05)。(2)体内实验结果显示,①Aza使经阴茎背静脉注射给药后第7天小鼠外周血CD4+CD25+Treg细胞数量增加,脾脏中Foxp3mRNA表达水平上升。②不同剂量Aza对小鼠外周血CD4+CD25+Treg细胞数量和脾脏中Foxp3mRNA表达水平影响不同。③按4ug/g.体重/day剂量给予Aza组对小鼠外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg比例和脾脏Foxp3mRNA表达水平的影响与其他实验组相比升高最明显,且均有显著性差异(P<0.05)。结论：在本实验中,无论是体内还是体外,甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine, Aza)即地西他滨(Decitabine)均可诱导初始CD4+CD25T细胞分化为CD4+CD25+Treg且Foxp3mRNA表达水平上调,但是不同剂量Aza对CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的影响效果不同。在体内,小鼠按4ug/g/d剂量给予Aza,在体外,浓度为5uM的Aza诱导CD4+CD25+Treg细胞的增殖和分化最明显。