【摘 要】
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【目的】视风膜神经节细胞(retinal ganglion cells-RGCs)死亡是许多眼病特别是青光眼的根本病理,而压力是导致RGCs凋亡的重要因素之一.我们用SD系大鼠脑源性星型胶质细胞同
【出 处】
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华中科技大学同济医学院 华中科技大学
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【目的】视风膜神经节细胞(retinal ganglion cells-RGCs)死亡是许多眼病特别是青光眼的根本病理,而压力是导致RGCs凋亡的重要因素之一.我们用SD系大鼠脑源性星型胶质细胞同化培养液双界面法培养羊抗鼠Thy1.1单克隆抗体纯化的SD系大鼠RGCs,在体外成功的使纯化培养的大鼠RGCs成活2w以上.在此基础上,研究不同压力下纯化培养的大鼠RGCs中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)mRAN及其蛋白质的表达;凋亡相关基因bcl-2、bax及p53 mRNA表达;Fas/FasL mRNA的表达以及L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)和左旋-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)在纯化培养的RGCs凋亡机制中的作用.探讨青光眼RGCs的凋亡机制.【结论】通过实验我们发现:①脑源性星形胶质细胞同化培养液双界面法能使纯化的RGCs存活较长时间,为进一步实验提供了体外纯化培养RGCs模型.②压力可激活视网膜神经节细胞诱导型一氧化氮合酶mRNA及其蛋白质的表达,由此产生超生理剂量的一氧化氮导致视网膜神经节细胞凋亡.③高于20mmHg的压力,时间超过24h可激活体外培养的视网膜神经节细胞的相关凋亡基因导致细胞的凋亡.④压力可激活视网膜神经节细胞Fas/FasL mRNA表达,Fas/FasL系统活化参与了青光眼高眼压下视网膜神经元细胞的凋亡.⑤L-精氨酸低浓度时能促进RGCs的生长,高浓度时则促进细胞凋亡;L-NAME对L-精氨酸的毒害作用则起抑制作用.
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