NF-κB在大鼠阿霉素心肌病中的活化及褪黑素干预作用的实验研究

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目的:探讨核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)在阿霉素(Adriamycin,ADR)心肌病中的活化及其作用,为研究阿霉素心肌病发病机制,临床防治阿霉素心肌病提供理论和实验依据。方法:Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为3组:对照组、阿霉素(ADR)组、阿霉素+褪黑素(ADR+MT)组,每组各10只大鼠。阿霉素(ADR)组:在实验第二天起腹腔注射阿霉素(ADR),2.5mg/kg/次、隔天一次,共用药6次,累积剂量15mg/kg;阿霉素+褪黑素(ADR+MT)组:腹腔注射等量ADR,在注射ADR前一天起注射褪黑素(Melatonin,MT),6.0mg/kg/次,每日一次,连用15天,累积剂量90mg/kg,当MT与ADR一起使用,MT在ADR前3小时注射;对照组:腹腔注射等量生理盐水。在注射ADR后第5周采集左心室心肌标本,HE染色观察心肌病理改变,分光光密度法检测心肌组织中一氧化氮(nitric oxide,NO)含量和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)活性,免疫组织化学法检测NF-κB的活性,原位末端标记法(terminal dUT nick end-labeling,TUNEL)法检测心肌细胞凋亡。所有的数据采用SAS6.12统计软件进行统计分析。结果:1、免疫组织化学染色显示:NF-κB在阿霉素(ADR)组显著活化,与对照组相比差异有显著性(P<0.05);褪黑素(MT)可抑制NF-κB的激活,阿霉素+褪黑素(ADR+MT)组与阿霉素(ADR)组相比有显著差异(P<0.05);阿霉素+褪黑素(ADR+MT)组与对照组相比无显著性差异(P>0.05)。2、NO含量、iNOS活性的检测:阿霉素(ADR)组与对照组相比显著升高(P<0.05);阿霉素+褪黑素组(ADR+MT)与阿霉素(ADR)组相比显著降低(P<0.05),但高于对照组(P<0.05)。3、TUNEL法显示:阿霉素组(ADR)心肌细胞凋亡指数(Apoptotic index,AI%)较对照组显著增加(P<0.05),而阿霉素+褪黑素(ADR+MT)组心肌细胞凋亡指数与阿霉素(ADR)组相比显著降低(P<0.05),与对照组相比有显著差异(P<0.05)。4、直线相关分析:NF-κB活性与iNOS活性及心肌细胞凋亡呈显著正相关。结论:1、阿霉素可诱导心肌组织中NF-κB活化;引起iNOS活性增高,NO含量增加;阿霉素可诱导心肌细胞凋亡。2、NF-κB激活参与了阿霉素心肌病的发生和发展。NF-κB的作用部分可能与促进iNOS表达,提高iNOS活性,诱导心肌组织过度合成NO,引起心肌氧化应激损伤,促进了心肌细胞凋亡有关。3、褪黑素可阻断NF-κB激活,减少自由基的生成,清除过多的自由基,抑制心肌细胞凋亡,褪黑素对阿霉素心肌病具有保护作用。
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