siRNA靶向沉默SPHK1对胃癌细胞迁移、侵袭的影响

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目的:应用小干扰RNA靶向沉默胃SGC-790、BGC-823细胞神经鞘氨酸激酶1(SPHK1)的表达,观察SPHK1敲除后对胃癌细胞侵袭与迁移的影响。  方法:人工化学方法合成SPHK1 siRNA和对照siRNA,分别转染胃癌BGC-823、SGC-7901细胞。Q-PCR检测SPHK1、Snail的mRNA表达;Western blot法检测SPHK1、E-cadherin、Vimentin和Snail蛋白的表达;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化;Transwell迁移实验检测细胞迁移能力的变化。  结果:SPHK1 siRNA转染胃癌SGC-7901、BGC-823细胞后,SPHK1蛋白的表达明显下调;与对照组比较,SPHK1 siRNA转染组Vimentin和Snail蛋白表达显著下调了,E-cadherin蛋白表达显著上调;SPHK1 siRNA转染组细胞侵袭能力明显降低(P<0.05),SPHK1 siRNA转染组细胞迁移能力明显降低(P<0.05)。  结论:SPHK1基因与胃癌细胞侵袭、迁移有着密切关系。SPHK1可能通过NF-?B、Wnt/β-catenin等信号通路,上调EMT调节因子Snail的表达进而改变细胞EMT相关标志蛋白E-Cadherin、Vimentin表达水平,促进EMT过程的发生,进而促进胃癌细胞的侵袭转移和肿瘤进展。
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