近年来，乳腺癌的发病率呈逐年上升趋势，手术、放疗、化疗及内分泌治疗仍是主要的治疗方法，化疗在治疗中占重要地位，而蒽环类药物又是乳腺癌化疗药物的基石之一。研究发现肿瘤的多药耐药直接影响到乳腺癌患者化疗疗效，成为化疗失败的重要难题。由多药耐药基因MDR1编码的P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）高表达是产生多药耐药（Multidrugresistance，MDR）的主要原因之一,也是目前研究最为广泛、深入且在临床实践中唯一得到证实的耐药机制。乳腺癌耐药蛋白（Breast cancerresistance protein，BCRP/ABCG2）是最新发现的一种肿瘤多药耐药蛋白，与P-gp具有相同的底物：蒽环类药物。ABCG2和P-gp高表达提示肿瘤对蒽环类药物耐药，化疗时避免使用此类药物，可使患者取得较好的疗效，所以探讨ABCG2、P-gp在乳腺癌中的表达不仅可以了解乳腺癌患者自身耐药情况，还对术后应用化疗药物具有重要的指导作用。包括乳腺癌在内，肿瘤的发生和发展是一个非常复杂的过程,与机体免疫功能具有密切的关系。机体抗肿瘤免疫主要分为T淋巴细胞介导的细胞免疫和B淋巴细胞介导的体液免疫。肿瘤发生时，机体的抗肿瘤免疫会发挥一定的作用，CD4是辅助性T淋巴细胞表面抗原，CD8是抑制性T淋巴细胞表面抗原，CD19表达于B淋巴细胞表面抗原，CD56表达于NK细胞表面抗原。实验室通过检测T、B淋巴细胞亚群及NK的表达情况了解机体的免疫状况。Ahmed等对早期造血细胞的研究表明，在体外ABCG2可使原祖细胞增加，CD＋19淋巴细胞的发育受损，降低移植小鼠B淋巴细胞数量；在体内ABCG2增加部分祖细胞的比例和原始祖细胞群的数量，在早期造血过程中作为调节蛋白起到重要的作用。所以，研究乳腺癌中ABCG2表达与淋巴细胞亚群的关系具有一定的创新意义。本研究采用免疫组织化学的方法检测乳腺癌组织中ABCG2、P-gp的表达，同时应用流式细胞仪检测乳腺癌患者血标本中淋巴细胞亚群的情况，结合临床资料，分别探讨乳腺癌患者机体的耐药状况及免疫功能情况，并分析其相关性。第一部分乳腺癌组织中ABCG2、P-gp的表达目的：检测乳腺癌耐药蛋白（Breast cancer resistance protein，ABCG2/BCRP）和P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）在乳腺癌组织中的表达，探讨两者的相互关系及其与肿瘤生物学特征的关系。方法：免疫组织化学方法检测85例乳腺癌和40例乳腺纤维腺瘤组织中ABCG2、P-gp蛋白表达，并结合乳腺癌的临床病理资料进行分析。结果：1ABCG2蛋白的表达：ABCG2蛋白主要表达于肿瘤细胞的细胞膜及部分细胞质，乳腺纤维腺瘤中仅见少量阳性着色。乳腺癌组、乳腺纤维腺瘤组中ABCG2蛋白阳性表达率分别是43.5%、25.0%，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。2P-gp蛋白的表达：P-gp蛋白主要表达于肿瘤细胞细胞膜，部分胞浆可以着色，极少数正常腺体上偶见微弱的棕黄色胞浆着色。乳腺癌组、乳腺纤维腺瘤组中P-gp蛋白阳性表达率为34.1%、15.0%，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。3ABCG2与乳腺癌临床病理资料的关系ABCG2蛋白表达与乳腺癌患者年龄、淋巴结转移、AJCC定义的肿瘤分期无关（P＞0.05），与肿瘤最大直径有关（P＜0.05）。肿瘤最大直径大于2cm的乳腺癌患者ABCG2蛋白表达率（52.6%）明显高于最大直径小于2cm者（25.0%）（P＜0.05）。4P-gp与乳腺癌临床病理资料的关系P-gp蛋白表达与乳腺癌患者年龄、肿瘤最大直径、AJCC定义的肿瘤分期无关（P＞0.05），与淋巴结转移有关（P＜0.05）。伴有淋巴结转移的乳腺癌患者中P-gp蛋白表达率（54.8%）明显高于无转移者（22.2%）（P＜0.05）。5乳腺癌中ABCG2和P-gp的表达呈正相关关系（r=0.219, P＜0.05）。结论：1乳腺癌与乳腺纤维腺瘤组织比较，ABCG2和P-gp蛋白阳性表达增多,提示ABCG2或P-gp阳性对临床选用敏感化疗药物及针对两种蛋白的治疗有指导意义。2ABCG2蛋白表达与乳腺癌肿块最大直径具有相关性，提示ABCG2与乳腺癌的恶性增殖有关；而P-gp蛋白表达与乳腺癌淋巴结转移具有相关性，对临床判断乳腺癌患者的预后有一定的价值。3乳腺癌中ABCG2和P-gp蛋白呈正相关，提示两者表达可能存在相互促进，可能存在相同的调解途径并且调节方向相同。第二部分早期乳腺癌患者淋巴细胞亚群计数目的：检测早期乳腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞亚群及NK细胞比值，探讨早期乳腺癌患者免疫功能状况及其临床意义。方法：四色荧光标记流式细胞术对20例乳腺癌患者和42例健康体检者（对照）外周血淋巴细胞亚群CD+3细胞、CD₄⁺细胞、CD+8细胞、B细胞、NK细胞进行相对计数,并对两组结果进行比较分析。结果：1T淋巴细胞亚群计数：早期乳腺组与对照组中CD+3细胞计数的平均值分别为76.44±6.07%、72.01±7.02%，两者比较差异有统计学意义（P＜0.05），CD₄⁺/CD+8平均比值分别为1.99±1.16、1.42±0.89，两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）。2B淋巴细胞亚群及NK细胞计数:早期乳腺组与对照组中B淋巴细胞计数的平均值分别为9.39±3.51%、11.56±2.54%，两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）；NK细胞计数的平均值分别为7.80±4.42%、14.91±4.87%，两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：1早期乳腺癌组与健康人相比T淋巴细胞亚群中CD+3细胞计数升高，CD₄⁺/CD+8比值升高,提示在乳腺癌早期机体细胞免疫功能紊乱，细胞免疫处于活跃状态。2早期乳腺癌组与健康人相比B淋巴细胞亚群计数降低，提示在乳腺癌早期机体的体液免疫功能下降；NK比值也下降，机体杀伤肿瘤的能力下降。第三部分晚期乳腺癌患者淋巴细胞亚群计数目的：检测晚期乳腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞亚群及NK细胞比值，探讨晚期乳腺癌患者免疫功能状况及其临床意义。方法：四色荧光标记流式细胞术对56例乳腺癌患者和42例健康体检者（对照）外周血的淋巴细胞亚群CD+3细胞、CD₄⁺细胞、CD₈⁺细胞、B细胞、NK细胞进行相对计数,并对两组结果进行比较分析。结果：1T淋巴细胞亚群计数：晚期乳腺癌组与对照组中CD₄⁺细胞计数的平均值分别为34.32±11.25%、43.00±8.99%，两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）； CD₈⁺细胞计数的平均值分别为34.33±13.29%、30.02±9.01%，两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）；CD₄⁺/CD₈⁺平均比值分别为1.21±0.71、1.42±0.89，两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）。2B淋巴细胞亚群及NK细胞计数:晚期乳腺癌组与对照组中B淋巴细胞计数的平均值分别为8.18±6.81%、11.56±2.54%，两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）；NK细胞计数的平均值分别为13.95±11.50%、14.91±4.87%，两者比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：1晚期乳腺癌组与健康人相比T淋巴细胞亚群中CD₈⁺细胞计数升高，CD+++4细胞计数、CD4/CD8比值下降,提示在乳腺癌晚期机体T淋巴细胞整体水平保持相对稳定，但CD++4/CD8比值失衡，机体细胞免疫处于下降趋势。2晚期乳腺癌组与健康人相比B淋巴细胞亚群计数降低，提示在乳腺癌早期机体的体液免疫功能下降，且较细胞免疫更早的反应机体的免疫状态；NK比值无统计学意义。第四部分乳腺癌中ABCG2、P-gp表达与血标本淋巴细胞亚群的关系目的：检测乳腺癌组织中ABCG2、P-gp蛋白的表达和外周血标本T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞亚群及NK细胞比值，探讨其相关性和临床意义。方法：1免疫组织化学方法检测20例乳腺癌组织中ABCG2、P-gp蛋白表达情况；2四色荧光标记流式细胞术检测相同患者术前外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞亚群及NK细胞比值。结果：1ABCG2与淋巴细胞亚群的关系ABCG2蛋白表达与乳腺癌患者淋巴细胞亚群中CD₄⁺淋巴细胞、CD₈⁺淋巴细胞、CD₄⁺/CD₈⁺比值和NK细胞比值无关（P＞0.05），与CD+3淋巴细胞（r=-0.600）和B淋巴细胞计数（r=-0.503）有关（P＜0.05）。2P-gp与淋巴细胞亚群的关系P-gp蛋白表达与乳腺癌患者淋巴细胞亚群中CD+3淋巴细胞、CD₄⁺淋巴细胞、CD₈⁺淋巴细胞、CD₄⁺/CD₈⁺比值和B淋巴细胞计数无关（P＞0.05），与NK细胞比值有关（r=0.471,P＜0.05）。结论：1ABCG2蛋白表达与乳腺癌患者淋巴细胞亚群中CD+3淋巴细胞和B淋巴细胞计数具有相关性,提示乳腺癌患者乳腺癌耐药蛋白表达可能与机体免疫功能相关。2P-gp蛋白表达与乳腺癌患者淋巴细胞亚群中NK细胞比值具有相关性,但是对乳腺癌患者T淋巴细胞和B淋巴细胞无相关性,提示乳腺癌患者P-糖蛋白表达可能与机体NK细胞杀伤功能相关。