扇贝裙边糖胺聚糖抗肿瘤作用及其机制的实验研究

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目的:通过体内、体外实验研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)的抗肿瘤药理活性,并初步探讨其抗肿瘤作用的机制。方法:1.体外抗肿瘤试验:采用体外细胞培养的方法,用MTT法观察不同浓度的扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对人大肠癌LOVO、宫颈癌HeLa、肝癌SMMC7721、肺癌A549等四种肿瘤细胞株增殖活性的影响,以分析SS-GAG的抗肿瘤活性。2.体内抗肿瘤试验:(1)建立小鼠移植性S180腹水癌模型,观察小鼠接种肿瘤后30d内的存活时间,并计算其生命延长率;(2)建立小鼠移植性S180实体瘤模型,观察SS-GAG的抑瘤率以及对生长曲线、脾指数、胸腺指数,肝重和白细胞计数的影响。3.SS-GAG对S180荷瘤小鼠细胞免疫活性的影响研究:用MTT法观察SS-GAG对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性、杀伤活性的影响,对脾淋巴细胞转化增殖的影响以及对NK细胞活性的影响。4.SS-GAG对荷瘤小鼠抗氧化功能的影响研究:采用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)、硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)、Fe2+与菲啉类物络合法测定血清总抗氧化能力(T-AOC)。观察SS-GAG对荷瘤小鼠血清总抗氧化能力、超氧化物岐化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响。结果:1.体外试验:与对照组相比,扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)在500、200、100、50、25μg·ml-1浓度时对离体培养的宫颈癌HeLa细胞的生长有非常明显的抑制作用(P<0.01),并存在浓度依赖性;扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)200、100、50、25μg·ml-1对大肠癌LOVO和肺癌A549肿瘤细胞的生长有抑制作用(P<0.05,P<0.01),各给药组细胞的增殖活性明显低于对照组,而对离体培养的肝癌SMMC7721细胞的生长影响则较弱(P>0.05)。2.体内试验:SS-GAG(15mg/kg、30mg/kg、60mg/kg)能显著延长S180腹水瘤小鼠的生存时间、抑制小鼠S180实体瘤的生长,对环磷酰胺所致的白细胞计数减少有对抗作用(P<0.05)。3.SS-GAG(15mg/kg、30mg/kg、60mg/kg)能显著增强荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性和杀伤活性(P<0.05,P<0.01),促进脾淋巴细胞转化增殖和NK细胞活性(P<0.01),提高小鼠的免疫功能。4.SS-GAG(15mg/kg、30mg/kg、60mg/kg)能提高小鼠的血清总抗氧化能力和超氧化物岐化酶结(SOD)的活性,降低脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量(P<0.05,P<0.01),增强小鼠的抗氧化功能。结论:扇贝裙边糖胺聚糖对实验性肿瘤模型具有抑制作用。其抗肿瘤作用可能与其增强细胞免疫和提高机体的抗氧化功能有关。
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