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目的：表皮干细胞是皮肤组织特异性干细胞，主要位于表皮基底层、毛囊外根鞘隆凸部以及皮脂腺边缘，具有很强的自我更新能力和分化的潜能，可分化形成全层表皮，并具有产生皮肤附属器的作用，在皮肤组织稳态的维持和创面修复过程中发挥重要作用。本实验体外分离培养和鉴定小鼠表皮干细胞，探讨高浓度葡萄糖对体外培养小鼠表皮干细胞的影响。 方法：利用Ⅳ型胶原的快速黏附法分离培养小鼠表皮干细胞，观察其形态学;通过免疫荧光法检测表皮干细胞标记物β1整合素和K19来鉴定表皮干细胞;将小鼠表皮干细胞分别放在不同浓度葡萄糖的培养基里培养;MTT法检测小鼠表皮干细胞增殖情况同时在倒置相差显微镜下观察小鼠表皮干细胞的数量及状态;细胞划痕实验检测高浓度葡萄糖对小鼠表皮干细胞迁移能力的影响;免疫印迹法检测高浓度葡萄糖对小鼠表皮干细胞凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的蛋白表达水平细胞。 结果：体外培养的小鼠表皮干细胞呈现出克隆样生长，增殖速度较快，细胞形态呈铺路石样，边缘细胞呈梭形，细胞核质比较大。免疫荧光法检测到培养的小鼠表皮干细胞β1整合素和K19呈阳性表达且阳性表达率均为100％。MTT法检测到与对照组（5.6mmol/L浓度葡萄糖）相比，15mmol/L浓度葡萄糖刺激72h后检测到细胞增殖速度无明显改变，而30mmol/L浓度葡萄糖刺激24h、48h和72h后检测到细胞增殖速度降低，并且具有统计学意义(p＜0.05)。而在倒置相差显微镜下观察细胞形态，可以看到与对照组相比，30mmol/L浓度葡萄糖刺激48h后细胞数量明显降低，并且部分细胞体积变大，形态发生改变。细胞划痕实验检测到对照组划痕被细胞填满所需时间为(53.67±2.68)h，30mmol/L高浓度葡萄糖组划痕被细胞填满所需时间为(69.27±1.78)h，统计学分析差异具有统计学意义(p＜0.05)。Western blot检测到与对照组相比，30mmol/L浓度葡萄糖刺激48h后凋亡蛋白Bax的表达水平增加，而抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平降低，并且灰度值分析结果显示，两者均有统计学意义(p＜0.05)。 结论：本研究结果表明高浓度(30mmol/L)葡萄糖可以明显抑制体外培养小鼠表皮干细胞的增殖，减弱小鼠表皮干细胞的迁移能力，并且一定程度上可以促进小鼠表皮干细胞的凋亡，从干细胞角度为糖尿病患者创面难愈的原因提供了一定的实验室依据。