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东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)是感染蜜蜂的慢性消化系统寄生虫,其可以影响意蜂(Apis mellifera L.)个体的生理、行为、健康和寿命,而且可能改变蜂群中工蜂的劳动分工、组织行为和数量。被东方蜜蜂微孢子虫感染的意蜂,对蔗糖表现得更为敏感,并且更不易与其它蜜蜂交哺饲喂食物。近年来,东方蜜蜂微孢子虫有逐渐取代西方蜜蜂微孢子虫(Nosema apis)并成为感染西方蜜蜂的主要微孢子虫种类的趋势,它被认为是引起蜂群崩溃综合症(colony collapse disorder,CCD)的一个主要原因之一。东方蜜蜂微孢子虫对新寄主西方蜜蜂的影响已得到广泛的研究并已引起人们足够的重视,但东方蜜蜂微孢子虫对原宿主东方蜜蜂(Apis cerana)影响的研究却相对较少。本实验以意蜂来源的东方蜜蜂微孢子虫感染中华蜜蜂,通过东方蜜蜂微孢子虫感染对中华蜜蜂行为、免疫基因表达和血淋巴中糖含量影响的观察,分析东方蜜蜂微孢子虫对中华蜜蜂健康的影响。主要研究结果:1、用不同浓度梯度东方蜜蜂微孢子虫溶液(103个/只、3x103/只、104个/只、3x 104个/只、105个/只)感染中华蜜蜂,记录分析中华蜜蜂感染率和死亡率。结果发现,浓度梯度越高的孢子溶液对中华蜜蜂的寿命影响越大,当东方蜜蜂微孢子虫浓度梯度达到105个/只时,对中华蜜蜂的感染率达到100%,该结果为我们对东方蜜蜂微孢子虫对中华蜜蜂影响的后续研究奠定基础。2、用浓度梯度为105个/只的东方蜜蜂微孢子虫感染中华蜜蜂,分析东方蜜蜂微孢子虫感染中华蜜蜂后,对中华蜜蜂非联想性学习(习惯化、致敏化)、联想性学习记忆及对不同浓度蔗糖溶液的伸吻反应,评估东方蜜蜂微孢子虫对中华蜜蜂行为的影响。结果发现,处理组中华蜜蜂对蔗糖溶液更加敏感。与对照组健康蜜蜂比较,在蔗糖浓度为10%、50%时,两者之间差异显著。此外,联想性学习训练2h后,处理组蜜蜂的记忆率显著高于对照组。3、利用荧光定量检测感染以及未感染东方蜜蜂微孢子虫的中华蜜蜂免疫基因(vitellogenin、abaecin、apidaecin、hymenoptaecin、defensin1、defensin2 和 eater)表达量,统计分析东方蜜蜂微孢子虫感染能否引起中华蜜蜂免疫应答。结果发现,东方蜜蜂微孢子虫感染致使免疫基因hymenoptaecin、defensin2表达量显著高于对照组。这说明东方蜜蜂微孢子虫对中华蜜蜂免疫基因的表达存在影响,会刺激蜜蜂免疫应答能力。4、通过HPLC和标准品对收集的东方蜜蜂微孢子虫感染组和对照组中华蜜蜂的血淋巴进行糖浓度定量分析,检测中华蜜蜂血淋巴中葡萄糖、海藻糖含量。结果表明,血淋巴中糖类含量无显著差异。东方蜜蜂微孢子虫对中华蜜蜂的血糖并无影响。