论文部分内容阅读
茯砖茶含有茶多酚、咖啡碱、氨基酸、多糖、微量元素等化学成分,具有抑菌、降脂减肥、降血糖、抗肿瘤等保健功效。此外,茯砖茶还具有清除自由基、保护细胞氧化受损活性,但目前只有湖南茯砖茶水提物抗氧化活性的零星报道,研究水平局限在粗提物和馏分水平,不够系统全面和深入。本研究通过系统分离法获得茯砖茶单体化合物,检测了不同溶剂提取物中的总多酚黄酮含量,评价了茯砖茶不同溶剂提取物和单体化合物的抗氧化活性。运用液-液萃取法、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、薄层色谱、高效液相色谱等手段,从茯砖茶提取物中分离纯化得到23个化合物,通过理化性质和波谱方法鉴定了11个化合物：(1)咖啡因,(2)邻苯二甲酸二异辛酯,(5)4,6,10,4’-tetrahydroxyaurone,(6)邻苯二甲酸二丁酯,(10)echinulin,(17) Neoechinulin A,(19)(-)-epigallocatechin3-O-gallat,(20) gallocatechin3-O-gallate(GCG),(21)(-)-epicatechin3-O-gallate(ECG),(22)(+)-catechin,(23)3,5,7,2’,5’-pentahydroxyflavan,化合物10和17均为首次从茯砖茶中分离获得。采用Folin-Ciocalteu比色法测定了茯砖茶不同溶剂提取物中茶多酚的含量,结果表明样品中的总多酚含量为60.05～292.09mg·g-1；通过三氯化铝比色法测定了茯砖茶不同溶剂提取物中黄酮的含量,样品中黄酮类化合物含量为83.24～222.86mg·g-1。采用DPPH法、ABTS法和铁还原法对茯砖茶不同溶剂提取物的抗氧化活性进行评价。结果表明,各溶剂部位清除自由基能力及铁还原能力最强者为乙酸乙酯部位,该部位组分清除DPPH、ABTS+自由基相应IC50值分别为0.043、0.027g·L-1。通过计算茯砖茶不同溶剂提取物中总多酚和黄酮含量与其抗氧化活性的关联性,发现茯砖茶不同溶剂提取物清除DPPH、ABTS+自由基的能力与总多酚含量相关性良好,与黄酮含量相关性较差,推测酚类物质是茯砖茶提取物清除自由基及抗氧化的主要成分之一。通过DPPH法和ABTS法评价了化合物1、3、4、5、9、10、12、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23的抗氧化活性。结果发现,化合物4、19、20、21、23在两种方法中IC50值均显著低于阳性对照Vc,即抗氧化活性显著高于Vc；化合物15在两种方法中IC50均与Vc无显著差别,说明化合物15抗氧化活性与Vc相当；化合物9、22在清除DPPH自由基实验中显示显著的抗氧化活性,IC50值显著低于Vc,在清除ABTS+自由基实验中IC50高于Vc；化合物5、12、16、17在两种方法中显示出抗氧化活性,但显著弱于Vc,认为其抗氧化活性一般。化合物1、3、10、14、18无抗氧化活性。