蛇莓Duchesnea India (Andr.) Focke系蔷薇科蛇莓属多年生草本植物,在全国各地均有分布。具有抗肿瘤、抑菌、抗病毒、免疫调节、中枢系统抑制等药理作用。近年来,国内外对蛇莓的研究主要集中在抗肿瘤这一领域,对蛇莓抑菌作用、抑菌活性成分及其抑菌机理的研究较少,且缺乏研究深度和系统性。为了开发新型中药抑菌剂和充分利用蛇莓资源,本研究筛选其最优提取工艺,进行了蛇莓水提物体外抗菌及体内调节免疫作用的研究。主要研究结果如下：1.蛇莓体外抗菌活性的研究：选择水和乙醇为提取溶剂,比较水提法、回流法、索氏提取法、超声法的提取效果,再进行水提工艺条件的优化。采用抑菌效应法,综合评分比较分析蛇莓各提取物的抑菌活性和得率,筛选最优提取工艺,进行蛇莓体外抑菌试验。结果表明：综合评分,水提法>索氏提取法>回流法>超声法。蛇莓水提法最优提取工艺为：提取时间58min,提取次数3,料液比1：36。钢管法检测结果显示,蛇莓水提物对金黄色葡萄球菌ATCC25923等5种标准菌株具有中度至高度的体外抗菌活性。二倍稀释法测定蛇莓水提物的MIC及MBC：对金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠杆菌ATCC25922、沙门氏菌C79-13、藤黄微球菌CMCC28001、铜绿假单胞菌ATCC9027的MIC和MBC值分别为1.56、25、6.25、3.13、25mg/mL和3.13、50、12.5、6.25、50mg/mL。抑菌曲线表明：当蛇莓浓度达到MIC和2MIC时,对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和铜绿假单胞菌的生长表现为杀菌活性；在2MIC的浓度下,大肠杆菌4h内被完全杀灭,对藤黄微球菌只有抑菌作用而没有杀菌效果。2.蛇莓对细菌生物膜的影响：应用刚果红平板法筛选生物膜形成阳性菌株。采用96孔板法造膜,根据菌膜形成能力划分标准筛选出中等或强生物膜形成能力的菌株,检测蛇莓水提物对细菌生物膜形成的影响。结果表明：蛇莓水提物3.13mg/mL对标准金黄色葡萄球菌生物膜形成的抑制与红霉素8μg/mL一致(P>0.05)；蛇莓水提物1.56mg/mL对10株金黄色葡萄球菌临床菌株生物膜形成的抑制与红霉素8μg/mL一致(P>0.05)；蛇莓水提物50mg/mL对8株大肠杆菌临床菌株生物膜形成的抑制能力与环丙沙星2μg/mL一致(P>0.05)。蛇莓对细菌生物膜形成的抑制效果呈浓度依赖性。3.蛇莓对细菌显微结构及超微结构的影响：以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为指示菌,研究了蛇莓体外抑菌作用的机制。结果表明,蛇莓使金黄色葡萄球菌质壁严重分离；细胞质不均匀,菌体出现空泡；有些细胞质溶解甚至出现大面积空腔；使大肠杆菌细胞壁呈皱褶状,出现明显的质壁分离,细胞质稀薄甚至解体,形成小空泡,严重者形成大面积空腔。由此推断,蛇莓对金黄色葡萄球菌的抑制机理符合膜打孔假说,对大肠杆菌的抑制机理主要是破坏细胞壁和细胞质。4.蛇莓对小鼠部分免疫功能的作用：通过环磷酰胺造模,探索蛇莓水提物对正常小鼠和免疫力低下小鼠机体的免疫调节作用。结果表明,蛇莓能较明显地提高正常小鼠的脾脏指数、血清中IgG的含量,增强其巨噬细胞的功能；蛇莓能较明显地提高免疫力低下小鼠外周血中T淋巴细胞的数量,升高其血清中IgM的含量。以上说明,蛇莓水提物在试验的剂量下,对正常小鼠和免疫力低下小鼠的部分免疫功能有影响。