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目的：通过两个部分逐步深入观察水蛭素通过WNT/PI3K/Akt信号通路和生长因子PEDF调控HRPE细胞分化情况。方法：第一部分：①采用消化培养法对HRPE细胞进行体外传代培养和细胞鉴定。②在前期实验的基础上,选取20U水蛭素作为干预浓度,随机分为3组,水蛭素组,wnt通路抑制组(20U水蛭素+100ng DKK1),空白对照组。对HREP细胞干预24小时,用FCM法检测细胞内np-β-Catenin蛋白的荧光表达情况。同时用ELISA法检测细胞外液PEDF表达情况。第二部分：①第一部分猜想成立,我们继续选取20U水蛭素作为干预手段进行第二部分的深入研究。②选取20U水蛭素作为药物浓度,随机分为3组,水蛭素组,wnt通路抑制组(20U水蛭素+100ng DKK1),空白对照组。对HRPE细胞干预24小时,用FCM法检测细胞膜上PEDF-R表达情况。③选取20U水蛭素作为药物浓度,随机分为4组,水蛭素组,wnt通路抑制组(20U水蛭素+100ng DKK1), PI3K/Akt通路抑制组(20U水蛭素+100ng SC66),空白对照组。用Western-bloting法检测np-β-Catenin蛋白、PIP3蛋白和OPN1(LW+MW)蛋白表达情况。结果：第一部分：水蛭素组np-β-Catenin,PEDF表达与空白组比较均上调。wnt通路抑制组np-β-Catenin,PEDF表达与空白组比较上调,与水蛭素组比较下调。差异均有统计学意义(p<0.05)。第二部分：①水蛭素组PEDF-R表达与空白组比较均上调。wnt通路抑制组PEDF-R表达与空白组比较上调,与水蛭素组比较下调。差异均有统计学意义(p<0.05)。②水蛭素组np-β-Catenin蛋白,PIP3蛋白,OPN1(LW+MW)蛋白表达水平较空白组上调。wnt通路抑制组β-Catenin蛋白,PIP3蛋白,OPN1(LW+MW)蛋白表达水平较水蛭素组下降,较空白组上调。PI3K/Akt通路抑制组np-β-Catenin蛋白,PIP3蛋白,OPN1(LW+MW)蛋白表达水平较水蛭素组下降,较空白组上调。差异均有统计学意义(p<0.05)。结论：20U水蛭素激活HRPE细胞wnt经典信号通路后能够上调生长因子PEDF及其受体PEDF-R的表达。PEDF表达上调后与其受体结合,通过活化PI3K/Akt信号通路上调视锥细胞蛋白OPN1 (LW+MW)的表达。因此,本研究发现,20U水蛭素具有通过wnt/PI3K/Akt信号通路和PEDF共同调控HRPE细胞向视锥细胞方向分化的趋势。