【摘 要】
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目的本研究通过构建D-IBS小鼠模型及慢性轻-中度UC小鼠模型,观察1、D-IBS模型小鼠及UC模型小鼠结肠黏膜中TNF-α、IL-6及IL-10含量的改变;2、D-IBS模型小鼠、UC模型小鼠及健康小鼠远端结肠黏膜钠氢转运体调节因子4（NHERF4）和溶质载体26A3（SLC26A3）的表达差异和病理组织学改变,通过分析D-IBS与UC模型小鼠肠黏膜中免疫-炎症因子的差异及NHERF4和SLC2
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目的本研究通过构建D-IBS小鼠模型及慢性轻-中度UC小鼠模型,观察1、D-IBS模型小鼠及UC模型小鼠结肠黏膜中TNF-α、IL-6及IL-10含量的改变;2、D-IBS模型小鼠、UC模型小鼠及健康小鼠远端结肠黏膜钠氢转运体调节因子4（NHERF4）和溶质载体26A3（SLC26A3）的表达差异和病理组织学改变,通过分析D-IBS与UC模型小鼠肠黏膜中免疫-炎症因子的差异及NHERF4和SLC26A3的表达改变,探索轻-中度UC和D-IBS是否存在相同的发病机制。方法1.利用急性束缚实验构建C57BL/6J小鼠D-IBS模型,观察小鼠的体质量、肠道出血情况、粪便含水量、结肠大体组织炎症损害和镜下病理组织学表现,并同时获取小鼠远端结肠黏膜组织。2.利用口服浓度为1.5%的DSS水溶液构建C57BL/6J小鼠慢性轻-中度结肠炎模型,观察小鼠的体质量、粪便含水量、大便隐血、结肠炎症损害和镜下病理组织学表现,同时获取小鼠结肠黏膜组织。参考Butzner JD标准行结肠大体组织学评分,参考Sutherland LR标准进行结肠炎疾病活动指数（DAI）评分,参考Gebose评分进行镜下病理组织学评分。3.酶联免疫吸附（ELISA）法测D-IBS模型小鼠、UC模型小鼠及对照组小鼠远端结肠黏膜中TNF-α、IL-6及IL-10的含量。4.免疫组织化学方法观察SLC26A3与NHERF4在D-IBS与UC模型小鼠肠黏膜上皮细胞中的定位表达。5.Western-blot法观察SLC26A3与NHERF4在D-IBS与UC模型小鼠肠黏膜上皮细胞中4在D-IBS与UC模型小鼠肠黏膜上皮细胞中的半定量表达。结果1.急性束缚实验诱导的C57BL/6J D-IBS小鼠模型试验中,D-IBS模型组小鼠粪便含水量升高、体重降低、肠道传输功能加快与人类D-IBS的临床症状相似,同时其大体组织学及病理组织学改变与人类D-IBS的大体组织学、病理组织学改变相似。2.1.5%浓度DSS水溶液诱导的C57BL/6J小鼠肠炎模型试验中,UC模型组小鼠出现便含水量升高、体重降低,与人类UC的临床症状相似;且其DAI评分、Gebose评分、大体组织学及病理组织学改变均与人类UC改变相似。3.D-IBS模型组小鼠、UC模型组小鼠远端结肠中TNF-α的含量及IL-6的含量均较正常对照组小鼠远端结肠中TNF-α的含量及IL-6的含量升高;D-IBS模型组小鼠、UC模型组小鼠远端结肠中IL-10的含量均较正常对照组小鼠远端结肠中IL-10的含量降低,差异存在统计学意义。4.D-IBS模型组小鼠肠黏膜组织中SLC26A3蛋白的表达量与UC模型组小鼠肠黏膜组织中SLC26A3蛋白的表达量均较正常对照组降低;D-IBS模型组小鼠肠黏膜组织中NHERF4蛋白的表达量与UC模型组小鼠肠黏膜组织中NHERF4蛋白的表达量均较正常对照组增高。结论1.急性束缚实验诱导的C57BL/6J D-IBS小鼠模型及低浓度DSS诱导的C57BL/6J小鼠肠炎模型适合作为D-IBS,轻-中度UC实验研究的动物模型。2.D-IBS与UC发生发展中可能均涉及免疫-炎症机制的激活。3.NHERF4/SLC26A3可能通过改变肠黏液层的通透性而参与了UC和D-IBS的发生发展。
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