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目的:乳腺增生病(Mammary Gland Hyperplasia, MGH)是一种既非炎症又非肿瘤的增生性病变,是以乳腺腺泡、导管上皮细胞及纤维结缔组织增生为基本病理变化的一类疾病总称,本质是一种生理性增生过度和复旧不全造成的乳腺正常结构紊乱。MGH是育龄期妇女最常见的乳腺疾病,其发病的高峰年龄为35～45岁,约占全部乳腺疾病的75%以上,其患病人群乳腺癌发生率较普通人群高2～3倍。因此积极治疗MGH,对预防乳腺癌、提高妇女生活质量具有重要意义。目前,西医对本病尚缺乏令人满意的治疗措施,其内分泌疗法副作用较大,长期使用可干扰体内激素的平衡,不宜作为常规用药。乳康方为治疗MGH临床经验方,针对肝气郁结、痰凝血瘀、冲任失调证有良好的疗效,本课题在临床己经证实中药乳康方治疗MGH有效的基础上,通过复制MGH的大鼠模型,采用中成药乳癖消、西药三苯氧胺(tamoxifen ,TAM)与乳康方相比较,观察其疗效,并通过分析模型大鼠血清细胞因子白细胞介素Ⅱ(Interleukin-2, IL-2)、肿瘤坏死因子(Tunmor Necrosis Factor, TNF-α)以及乳腺组织病理的变化与MGH的相关性,揭示MGH从免疫学方面的部分发病机理,并探讨中药乳康方对MGH治疗作用机理,丰富和发展中医治疗学。方法:选用健康清洁级雌性Wistar大鼠70只,75～85日龄,体重220±20g,常规喂养1周后,按照随机数字表法将其分为6组:即空白对照组(正常组)、模型对照组(模型组)、乳癖消对照组(乳癖消组)、TAM对照组(TAM组)、乳康方低剂量组(乳康方Ⅰ组)、乳康方高剂量组(乳康方Ⅱ组)。正常组与模型组每组15只大鼠,其余四组每组10大鼠。正常组给予每只大鼠右下肢肌注生理盐水注射液0.2ml/kg/d,共干预30天;其余组给予每只大鼠右下肢肌注射苯甲酸雌二醇0.5mg/kg/d,共25天,后改为注射黄体酮注射液5mg/kg/d,共5天。实验第31天随机从模型组和正常组各抽取5只大鼠,游标卡尺测量第2对乳房的直径,无菌操作楔形取大鼠第3对乳房。结果:光镜下显示与正常组比较,模型组大鼠乳腺组织乳腺腺管和腺泡明显增生,提示造模成功。成功建立MGH大鼠的模型后,各组开始分组治疗,每日每组按10ml/kg/只体重灌服:乳癖消片混悬液,TAM混悬液,乳康方低剂量汤药,乳康方高剂量汤药,正常组及模型组均灌服蒸馏盐水,共30天。实验结束大鼠无一死亡。末次灌胃后,大鼠禁食24小时,游标卡尺测量第2对乳房的直径,断头取血,制备血清,放射免疫法测定血清细胞因子IL-2与TNF-α以及血清生殖激素雌二醇(E2)、孕酮(P)、催乳素(PRL)的含量。无菌操作楔形取下大鼠第2对乳房,用4%的多聚甲醛溶液固定,石蜡包埋切片,常规HE染色,在光镜下进行组织形态学观察。结果:1大鼠乳头直径的变化与正常组相比,模型组大鼠乳头直径明显增大,有统计学意义(P<0.01)。经治疗后,乳癖消组、TAM组乳头直径减小,与模型组相比有统计学意义(P<0.05);乳康方Ⅰ组和乳康方Ⅱ组乳头直径明显减小,与模型组相比有显著性差异(P<0.01)。2血清IL-2和TNF-α与正常组相比,模型组大鼠血清中IL-2的含量降低,有统计学意义(P<0.05)。经治疗后,乳癖消组、TAM组和乳康方Ⅰ组IL-2的含量均有升高的趋势,与模型组比较有统计学意义(P<0.05);乳康方Ⅱ组含量明显升高,与模型组比较有统计学差异(P<0.01)。与正常组相比,模型组大鼠血清中的TNF-α含量升高,有统计学意义(P<0.05)。经治疗后,乳癖消组、TAM组和乳康方Ⅰ组IL-2的含量均有降低的趋势,但与模型组比较无统计学意义(P>0.05);乳康方Ⅱ组含量降低,与模型组比较有统计学差异(P<0.05)。3血清生殖激素结果与正常组相比,模型组大鼠血清中E2的含量明显升高,有显著差异(P<0.01)。经治疗后,乳癖消组、TAM组、乳康方Ⅰ组含量均降低,与模型组比较有统计学意义(P<0.05);乳康方Ⅱ组含量明显降低(P<0.01),与模型组比较有统计学意义。与正常组相比,模型组大鼠血清中P的含量明显降低,有统计学意义(P<0.01)。经治疗后,乳癖消组、乳康方Ⅰ组含量均有升高的趋势,但与模型组比较无统计学意义(P>0.05);TAM组含量明显升高,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。乳康方Ⅱ组含量明显升高(P<0.01),与模型组比较有显著性差异。与正常组相比,模型组大鼠血清中PRL的含量升高,有统计学意义(P<0.01)。经治疗后,乳癖消组、TAM组、乳康汤Ⅰ组PRL的含量均有降低的趋势,与模型组比较有统计学意义(P<0.05);乳康汤Ⅱ组含量明显降低,与模型组比较有统计学差异(P<0.01)。结论:1 MGH大鼠乳头直径明显增大,病理图片显示模型组乳腺组织增生呈弥漫性,腺泡和小叶显著增加,腺泡腔和腺导管腔明显扩张,与临床相符,提示模型复制成功。2与正常组比较,MGH大鼠血清中IL-2降低,TNF-α升高,提示免疫系统紊乱是导致MGH发病的重要因素。乳康方高剂量组能够提高MGH模型大鼠体内IL-2含量、降低TNF-α水平,增强机体免疫功能,促进MGH大鼠乳腺组织的恢复。本实验从免疫学方面揭示乳康方治疗MGH的部分机理,并提示乳康方高剂量组治疗MGH的效果优于低剂量组。3血清中E2和PRL的含量较正常组升高,P的含量降低,提示MGH大鼠存在生殖激素的紊乱。乳康方通过调整生殖激素E2, R, PLR的分泌水平,下调机体免疫系统,改善内分泌,达到治疗MGH的目的。而且乳康方高剂量组与乳癖消组、TAM组以及乳康方低剂量组相比较,疗效显著。