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背景:胃癌在全世界范围内是第二大常见肿瘤,是发病率最高的癌症之一。胃癌5年生存率约在20%,且胃癌的发病率随着年龄的增加而显著升高。肝窦状内皮细胞黏附分子（Liver sinusoidal endothelial cell lectin,LSECtin）属于Ⅱ型C型凝集素跨膜蛋白,高表达于肝脏血窦和淋巴结窦内皮细胞。LSECtin在维持机体稳态、免疫防御以及免疫监视等过程中发挥重要作用,研究发现LSECtin参与黑色素瘤、结肠癌和乳腺癌等多种肿瘤的发生发展。本课题组前期结果证明:胃癌细胞株不表达LSECtin;LSECtin重组蛋白能够与胃癌细胞黏附;LSECtin促进胃癌细胞的迁移和增殖。在上述研究结果的基础上,本文进一步探讨LSECtin参与胃癌发生发展的作用机制。纤连蛋白1（Fibronectin 1,FN1）是一种大分子二聚体糖蛋白,能够结合细胞表面物质,包括胶原、纤维蛋白、肝素、DNA和肌动蛋白,调节血管生成、细胞粘附、迁移和侵袭等过程。研究发现,胃癌患者的FN1表达量高提示预后不良。染色体域解旋酶DNA结合蛋白4（Chromodomain helicase DNA binding protein 4,CHD4）是核小体重塑和脱乙酰酶复合物的主要成分,通过调节细胞周期蛋白和蛋白依赖性激酶蛋白抑制剂的启动子活性调控细胞周期。多项肿瘤研究表明,CHD4表达水平与肿瘤转移、复发和生存期呈正相关,调控肿瘤细胞的迁移和增殖。FN1和CHD4已被报道能够与转录因子结合参与肿瘤发展和转移,FN1和IL11/STAT3信号传导途径被转录因子HMGA2激活正向调控EMT转化和结直肠癌的转移,FN1启动子区被XBP1s转录因子结合调节结肠癌细胞的转移,CHD4在胶质母细胞瘤中通过转录因子ZFHX4与CHD4结合发挥致癌作用。因此,本文进一步探讨转录因子对FN1和CHD4的调控作用。信号传导和转录激活因子（Signal transducers and activators of transcripition,STAT1）为STATs家族中最早被发现的,是干扰素信号的重要组成部分。它在细胞因子、生长因子和激素的刺激下介导多种细胞功能,具有信号传导和转录调控双重功能。STAT1作为一种转录因子,直接调控Caspase、Bcl-2等多个基因的表达,并与p53和TRADD等其他蛋白质相互作用。在不同的癌细胞类型中检测到STAT1促进细胞凋亡。胃肠道癌中STAT1高表达的肿瘤患者比低表达或表达阴性的肿瘤患者有更好的临床疗效,提示STAT1在胃癌发生发展中具有一定的功能和作用。目的:筛选与LSECtin相关的肿瘤基因;利用生物信息学预测分析差异表达基因相关的转录因子;探讨LSECin对差异表达肿瘤相关基因和转录因子的调控作用;探讨转录因子对差异表达基因的调控作用及其机制研究。方法:采用PCR Array基因芯片技术筛选与LSECtin相关差异表达的肿瘤基因;应用TCGA数据库发现FN1和CHD4基因在正常组织和胃癌组织中的表达,采用RT-PCR及Western blot技术检测FN1和CHD4在胃癌细胞中的表达;采用qRT-PCR及Western blot技术检测胃癌细胞不同时间段LSECtin诱导后FN1和CHD4表达量的变化;通过JASPAR数据库与PROMO数据库预测共调控FN1和CHD4的转录因子及其结合位点;采用q RT-PCR及Western blot技术检测LSECtin诱导后胃癌细胞STAT1表达量的变化;采用q RT-PCR及Western blot技术检测敲低或过表达STAT1的胃癌细胞中FN1和CHD4的表达水平;采用染色质免疫共沉淀技术（Ch IP）检测转录因子STAT1与FN1和CHD4间的结合作用。结果:PCR Array基因芯片结果显示,LSECtin上调FN1和CHD4基因的表达,且q RT-PCR实验验证与芯片结果一致;TCGA数据库结果表明,FN1和CHD4在胃癌组织中比在正常组织中表达量高,且随肿瘤恶性程度的增加而增加;Western blot实验结果证明,胃癌细胞FN1和CHD4蛋白表达量明显高于人正常胃粘膜细胞;q RT-PCR及Western blot实验结果证明LSECtin上调胃癌细胞AGS、BGC-823和MGC-803的FN1和CHD4表达;JASPAR数据库与PROMO数据库的生物信息学预测显示,转录因子STAT1在FN1和CHD4基因的启动子区存在多个结合位点;q RT-PCR及Western blot实验表明LSECtin下调STAT1的表达;q RT-PCR及Western blot实验结果表明,敲低STAT1上调胃癌细胞FN1和CHD4的表达,过表达STAT1下调胃癌细胞FN1和CHD4的表达;染色质免疫共沉淀技术证明转录因子STAT1直接结合FN1和CHD4基因的启动子。结论:PCR Array基因芯片筛选FN1和CHD4为LSECtin相关的肿瘤基因,LSECtin上调FN1和CHD4表达;FN1和CHD4在胃癌组织中的表达量明显高于正常组织,在胃癌细胞的表达量高于人正常胃黏膜细胞;在胃癌细胞中LSECtin下调STAT1的表达,通过STAT1直接结合FN1和CHD4促进胃癌发生发展。