克罗诺杆菌是一种条件致病菌，易感染新生儿、早产儿及免疫力低下的婴幼儿，感染会引起脑膜炎、结肠炎和败血症等症状，死亡率高达40%以上。克罗诺杆菌在自然界的污染来源尚不清楚，但许多克罗诺杆菌引起的新生儿和婴幼儿感染事件表明，配方奶粉是此类感染的主要来源。因此，对奶粉生产环节克罗诺杆菌的污染及其特性研究显得尤为重要。本研究对陕西有代表性的三个羊奶粉生产企业加工过程中的关键点取样，探讨了克罗诺杆菌的污染规律，并对分离菌株的毒力基因、耐药性、耐热性及化学杀菌剂耐受性等特性进行了研究，同时应用PFGE分型方法对分离菌株的同源性进行了评价。主要结论如下：1.对A、B、C三个企业生产过程中不同工序采集的760样品进行克罗诺杆菌分离鉴定，共检出67个阳性样品，检出率达8.8%。在67株分离株中，24株(35.8%)为黏液型菌株，43株(64.2%)为光滑型菌株。A、B、C三厂的检出率分别为12.1%(31/256)、12.3%(32/261)和1.6%(4/243)。其中粉状样品检出率最高达28.4%；其余依次为涂抹样品10.9%；车间内部空气样品6.7%，液态样品3.2%。落地粉和涂抹样品检出率较高。2.对67株分离菌株进行PCR鉴定。其结果为：①88.1%的菌株为C. sakazakii，是生产过程中最广泛的菌株类型。菌株C. malonaticus、C. muytjensii、C. universalis的检出率分别为9.0%、1.5%和1.5%。菌株C. turicensis， C. condimenti和C. dublinensis均未检出。②毒力基因cpa、hly、sip和ompX的检测结果显示，检出率为100%。携带的毒力基因型包括ompX、ompX+hly、ompX+cpa和ompX+cpa+hly，检出率分别为16.4%、3.0%、37.3%和43.3%，sip基因未检出。3.药敏试验表明：分离菌株对利福平的抗性最高（100%），其次是甲氧苄啶/磺胺甲恶唑（49.3%）。所有受试菌株对环丙沙星、加替沙星、硫酸庆大霉素、链霉素、氨苄西林、头孢曲松钠、头孢哌酮和四环素均100%敏感。各企业间的分离株对不同抗生素的耐药性存在差异，但对利福平和甲氧苄啶/磺胺甲恶唑的耐药性表现一致。多重耐药克罗诺杆菌(≥3)分离率为7.5%。4.耐热性试验表明：光滑型菌株D60为0.77~0.95min，黏液型菌D60为1.22~1.54min。黏液型菌株D60>光滑型菌株D60（P<0.05）。80°C以上可快速使克罗诺杆菌灭活。化学性杀菌结果显示：1.5%硝酸和2.0%硝酸作用于15min后，3株黏液型菌株仍有活性。1.5%、2.0%、2.5%的氢氧化钠；3%，5%的漂白粉；3%双氧水溶液及75%酒精作用后菌株均失活。结论：分离菌株酸耐受性强于碱耐受性；黏液型菌株耐热性、耐酸性强于光滑型菌株。5.采用PFGE方法在XbaI酶作用下，67株克罗诺杆菌分型结果为27个。其中43（64.2%）株菌集中在5大分型中（D-1至D-5）。企业间的分离菌株PFGE分型无交叉，表现出较大的遗传多样性。每个厂的分离菌株之间表现出较大的同源性。A厂检出的31株分离菌株，分为11个型。分离自半成品和各工序的采样点（喷雾干燥设备、流化床、流化床车间落地粉、传输带、员工鞋底、包装车间地面和包装车间落地粉）菌株表现出较高的同源性。分析得车间落地粉及人员交叉感染是半成品污染的潜在渠道。B厂检出的32株分离菌株，分为12个型。生产管道水样、喷雾干燥器设备和喷雾干燥器设备操作台的分离菌株之间同源性较大。C厂检出的4株分离菌株，分为4个型。各菌株之间的相似性系数低于50%，同源性较低。