黄芪—莪术配伍联合奥沙利铂对CT26.WT原位移植瘤小鼠中趋化因子及其受体表达的影响

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[目的]本研究采用手术手段建立Balb/c小鼠结肠癌原位移植瘤模型,探讨中药扶正祛邪药对——黄芪-莪术水提物与奥沙利铂(L-OHP)联合应用抑制鼠结肠癌CT26 wild-type(CT26.WT)细胞的转移,并调控CXCR3、CCR6、CXCL9、CCL20在mRNA及蛋白水平的表达。[方法]1.建立Balb/c小鼠结肠癌原位移植瘤模型,观察各组肿瘤在小鼠体内的生长情况,初步观察小鼠肝脏转移的情况。2.通过黄芪-莪术分别以高、中、低剂量联合L-OHP对小鼠治疗,观察用药后小鼠体重,瘤体大小,肝脏转移情况的变化。3.采用Real time-PCR方法分别检测原位移植肿瘤灶与肝转移灶CXCR3、CCR6、CXCL9、CCL20mRNA 的表达情况。4.采用Western Blotting方法分别检测原位移植肿瘤灶与肝转移灶CXCR3、CCR6、CXCL9、CCL20的蛋白表达情况。[结果]1.成功建立Balb/c小鼠结肠癌原位移植瘤模型,成模率达到100%。2.L-OHP单独应用和联合中药应用均能抑制原位移植瘤体的增大,阳性药抑制原位移植瘤生长的效果最好(P<0.01)。联合用药能降低肝转移灶的发生(P<0.05)。3.阳性药组及联合用药低剂量组CXCR3及CCR6mRNA的表达显著下调(P<0.01)。用药组CXCL9、CCL20mRNA表达未见统计学意义。4.与空白对照组相比,联合用药能不同程度下调CXCR3、CCR6蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。在肝组织内,联合用药可以下调CXCL9、CCL20蛋白表达(P<0.01)。[结论]L-OHP联合黄芪-莪术作用于荷瘤小鼠能够显著地抑制原位移植结肠癌的肝转移,降低趋化因子CXCR3、CCR6蛋白与mRNA的表达,低剂量联合效果最显著,具有浓度依赖性。中药联合化疗药抗肿瘤转移机制可能与下调CXCR3、CCR6蛋白与mRNA相关,对CXCL9、CCL20蛋白与mRNA的影响尚待进一步实验证明。CXCR3、CCR6可成为判断结肠癌预后的潜在靶点。
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