羊传染性脓疱病俗称羊口疮,是由羊传染性脓疱病病毒引起的一种人兽共患病,羊口疮病毒是痘病毒科副痘病毒属的代表性成员之一,种属特性鲜明而独特。该种属其它病毒还包括牛丘疹性口炎病毒、假牛痘病毒以及红鹿、松鼠、海豹副痘病毒等。目前,羊口疮病呈世界性分布,发病率逐年上升,给养羊业带来了一定程度的损失。该病是主要通过损伤的皮肤和黏膜感染传播,可以引起绵羊、山羊等多种动物以及人发病的一种急性、高度接触性传染病。ORFV基因组为双链线状DNA,长约138kbp,不同毒株长度有10-25kb的差异,病毒粒子长250-280nm,宽170-200nm,呈椭圆形的线团样；除椭圆型颗粒外,还有锥形、砖形以及特殊的线团样球形颗粒。病毒粒子表面呈特征性的编织螺旋结构绳索样结构相互交叉排列,围绕病毒粒子的长轴作8字形缠绕,但也有呈其他缠绕方式。目前认为ORFV编码134个假定基因；机体感染羊口疮病毒,首先自身启动免疫系统抵抗病毒的侵袭,这主要指是各种先天免疫细胞诱导趋化因子和细胞因子的分泌。在病毒侵袭的地方出现大量的NK细胞,中性粒细胞和树状突细胞。另外,羊口疮病诱导机体释放干扰素-α (IFN-α),白细胞介素-1β (IL-1b),IL-8,粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和IFN-γ,事实上从定性的角度看,致弱的羊口疮病毒也同样引起以Thl-型为主的免疫应答方式,这说明免疫应答反应主要是病毒粒子自身引起的。羊口疮病毒编码的毒力因子主要有病毒干扰素抑制蛋白(OVIFNR, ORF02)、趋化因子结合蛋白(CBO, ORF112)、GM-CSF/IL-2抑制蛋白(IF, ORF117)、IFN阻力因子(牛痘E3L基因编码)、病毒白细胞介素10(VIL-10, ORF127)和血管内皮生长因子(VEGF, ORF132)等。国内外对羊口疮的病原进行了大量研究,且ORFV部分基因的功能现在已经确定,但是对其毒力因子研究还不是特别清楚,它们在口疮病毒感染宿主的过程中起重要作用。因此,研究毒力基因在羊口疮不同毒力株中的变异情况,将有助于探明其分子变异与致病力之间的关系。基于此,本实验进行了如下研究：1羊口疮病毒湖北株的分离与鉴定利用MDBK细胞从湖北某疑似发病绵羊痂皮病例中分离羊口疮病毒；根据NCBI羊口疮病毒CBP基因序列,采用Primer5生物软件设计一对特异性引物,PCR扩增CBP基因；用分离的病毒进行动物回归实验。通过动物接种实验结果表明：接种羊口疮病毒的MDBK细胞在接种后3-4d内产生细胞病变(CPE),其特征性病变表现为细胞聚集、肿胀、融合、细胞间质增宽,折光性增强,直至脱落；用设计的特异性引物对病毒基因组CBP基因进行PCR扩增,电泳显示扩增出约843bp的清晰条带,与目的基因片段长度一致；利用该病毒成功复制出临床病例,证实其对家兔、羊等具有高度的致病性。2羊口疮病毒不同毒力毒株部分功能基因测序及其比较基因组学研究通过PCR技术鉴定疫苗株、强毒株和传代致弱毒株感染宿主细胞的功能基因,成功扩增出三株不同毒力ORFV毒株的6个功能基因；并通过测序找出不同毒力毒株相同功能基因的序列差异,靶标差异片段及分析其对应关系,为从基因组学水平系统解析羊口疮病毒弱毒株致弱的分子机制积累数据。