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废次烟叶的综合利用和烟草薄片质量的提高对烟草企业有巨大的经济意义。本论文筛选出一株产香菌A17,并对本试验室原有的能降解烟碱的节杆菌AN进行了诱变处理,提高其产酶能力;进而研究了两者的发酵条件,最终将其应用在废次烟叶的强化发酵和烟草薄片提取液的处理中,结合酶制剂的作用,取得了良好的效果。论文主要内容和结论如下:
筛选鉴定:通过平板筛选和提取液摇瓶复筛,筛选出一株产香菌,根据其生理生化特征及16srDNA序列分析,鉴定为巨大芽孢杆菌(B.megaterium),命名为A17。对实验室原有降烟碱菌AN进行紫外诱变,使其烟碱脱氢酶酶活提高72.2%。
发酵条件:经过摇瓶实验,A17在烟草提取液中的最佳发酵条件为:初始pH7.0,摇床转速200r/min,接种量6%,发酵温度30℃。拮抗试验表明:降烟碱AN与致香菌A17在平板上无拮抗作用,但在液体培养基中,降烟碱能力受到抑制。
烟草提取液发酵工艺研究:以物水比1:8浸提烟叶,以磷酸调pH值至3.5,先后加入植物水解酶制剂和蛋白酶,各搅拌1h,渣液分离。滤渣干燥粉碎用于化学成分测定,滤液定量。测定结果表明70%蛋白降解,52%的烟碱、全部还原糖进入提取液。为进一步处理打好了基础。
提取液巴氏杀菌,先后接种AN和A17菌液,发酵36h,提取液嗅香明显好转。离心得到菌体,用以生产美拉德香气物质,再与浓缩过的原离心上清液混合,回加到烟叶上,测定结果表明烟叶化学品质更协调,香气品质得到很大提高。
先后接种AN和A17菌液到废次烟叶上进行强化发酵,结果显示烟叶颜色稍有加深,青杂气显著减少,嗅香转好,吸食质量提高。