论文部分内容阅读
研究背景缺血／再灌注损伤是临床上常见的一种损伤现象,损伤不仅仅发生于缺血／再灌注的器官本身,对其相邻甚至远隔的器官亦造成一定的损伤,其中肺组织常被累及。心肌缺血／再灌注损伤最为常见也是迄今研究最多的器官缺血／再灌注损伤,已有研究表明心肌缺血／再灌注可引起的脑、肝、肾等器官的损伤,但是对肺组织是否也造成损伤,目前仍不明确。目前国内外对心肌缺血／再灌注后对肺组织的损伤方面的研究报道较少。因此我们对大鼠心肌缺血／再灌注损伤后对肺组织影响做相应的研究可为基础研究的进一步深入及临床工作中对疾病的诊治提供一定的理论依据。目的1.在现有文献基础上建立成年大鼠心肌缺血／再灌注损伤模型；2.电镜下观察大鼠心肌缺血／再灌注损伤后肺组织的病理学变化；3.检测血清中CK的变化及血清和肺组织中MPO、ICAM-1、MDA和HSP70含量的变化；4.探讨心肌的缺血／再灌注对肺组织损伤的可能机制。材料与方法健康雄性SD大鼠,成年大鼠(4-6月龄),购自山西医科大学实验动物中心。分别随机分为2组：伪手术对照组,缺血／再灌注损伤组。1.在体大鼠心肌缺血／再灌注损伤模型的建立伪手术对照组(n=10)：在左冠状动脉的前降支(LAD)下穿刺引线,不需要结扎,持续210min缺血／再灌注损伤组(n=10)：可使用活结结扎LAD使得心肌缺血,且持续30min后,松开活结,血.流恢复,再灌注3h；2采用Even’s blue和TTC双染色,测量心肌危险区面积、测定梗塞区的面积。3.标本收集再灌注3小时后开腹,腹主动脉处采血,静置30min后离心(3000r/min15min),上清液分装后于一70℃冰箱保存备用；采血完成后立即开胸,切取部分布下肺组织,肝素生理盐水洗净,滤纸吸干,切块分装后保存与-70℃冰箱备用。4.取部分右肺组织10%甲醛固定,石蜡包埋,HE染色。5.血清CK及血清和肺组织MPO、ICAM-1、MDA、HSP70的测定测定严格按照试剂盒上的操作步骤进行测定。6.采用SPSS16.0统计软件包分忻进行统计学处理,把所得到数据以x±s表示,采用单因素方差分析(ANOVA)作均数间比较。以P<0.05作为差异具有统计学意义。结果1.大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型成功建立1.1结扎左冠脉前降支(LAD)后,与伪手术对照组相比,心肌缺血/再灌注损伤组心电图Ⅱ导联ST段弓背向上抬高到了0.15mV以上,表明心肌缺血。于30min后松开活结放松结扎线,当Ⅱ导联的ST段下降达1/2以上时,提示心肌组织恢复血液的灌流,即心肌缺血/再灌注损伤的模型成功建立(图1)。1.2心肌梗塞面积在心肌缺血/再灌注损伤时的变化危险区的面积/左心室面积的百分比(AAR/LV比值)：在伪手术对照组与缺血/再灌注损伤组之间无明显的差异,各模型的缺血程度基本一致,说明手法均一,实验结果具有可比性。心肌梗塞的面积/危险区面积百分比(AN/AAR比值)：缺血/再灌注损伤组与伪手术对照组相比明显增高(P<0.05)(表2)。1.3心肌缺血/再灌注损伤时对血清CK活性变化的影响缺血/再灌注损伤组与伪手术对照组相比,血清里CK的活性显著上升。2.心肌缺血/再灌注损伤对血清及肺组织MPO、ICAM-1、MDA及HSP70含量的影响结果显示：缺血/再灌注损伤组血清及肺组织中的MPO、ICAM-1、MDA及HSP70含量均明显高于伪手术对照组。结论1.大鼠心肌缺血/再灌注后会对肺组织造成一定的损伤。2.肺组织损伤的发生可能与中性粒细胞的聚集、氧自由基增加及热休克蛋白的释放所引起的损伤有关。