七氟烷预处理联合后处理对鼠肺缺血再灌注损伤ACEmRNA的研究

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目的:评价七氟烷预处理联合后处理对大鼠肺缺血再灌注损伤时肺组织血管紧张素转化酶(ACE)m RNA的影响,探讨七氟烷预处理联合后处理对肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法:选择新疆医科大学动物实验中心提供的健康、清洁级、SD大鼠,体重在250~350g之间,计算出本研究所需大鼠共54只,每组18只。将大鼠按照随机数字表法随机分为3组(n=18)。假手术组(S组):大鼠进行腹腔注射麻醉后仰卧位固定,游离大鼠气管,行气管插管术,接小动物呼吸机行机械通气30 min后,大鼠行右侧卧位,并在大鼠左侧第5肋间进胸,游离左肺门,并应用在0.9%氯化钠注射液中浸泡过的湿纱布覆盖所暴露的肺组织制备S组模型;肺缺血再灌注组(I/R组):采用同S组模型同样模型制备方法对大鼠肺组织进行暴露,于大鼠呼气末采用无创血管对所游离出的大鼠左肺门(包括左主支气管、左肺动、静脉)进行夹闭。在大鼠肺门阻断45 min后,松开血管钳恢复大鼠肺组织的血液循环和通气,形成肺组织的缺血再灌注模型;七氟烷预处理联合后处理组(SPr+o组):在对大鼠左肺门进行阻断前前吸入2.1%七氟烷30 min,洗脱10 min,然后阻断左肺门45 min,并于形成再灌注的即刻再次吸入2.1%七氟烷30min,以此制备七氟烷联合处理组的模型。并分别于再灌注30、60和120 min时随机处死6只大鼠,取大鼠肺组织,测定大鼠肺组织湿重/干重比值(W/D比值),苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)行组织学检查,比色法测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)表达水平,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,Elisa)测定血浆内皮素-1(endothelin-1,ET-1)表达水平,RT-PCR法测定ACEm RNA的表达。结果:与S组相比,Spr+o组和I/R组再灌注各时点肺组织W/D、ACEm RNA及血浆ET-1、MDA表达水平均升高(P<0.05)。与I/R组相比,Spr+o组再灌注各时点肺组织W/D比、ACEm RNA及血浆ET-1、MDA表达水平均下降(P<0.05)。Spr+o组再灌注各时点肺组织病理损伤与I/R组相比均有所减轻。结论:七氟烷预处理联合后处理对缺血再灌注损伤肺的保护其机制可能与下调ACEm RNA、ET-1表达及减少氧自由基有关。
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