论文部分内容阅读
1目的临床证实康艾注射液与多西他赛注射液联用较单用多西他赛注射液表现出更好的疗效并且减轻了多西他赛的毒副作用。然而,关于两药联用的药动学的研究较少,更多的是两药药效的协同作用研究。药动学和药效学在体内密切相关,临床疗效的改变可能与两药联用后导致体内药动学的变化有关。因此本研究从以下几个方面探究联用康艾注射液后是否导致多西他赛在大鼠体内药动学行为的变化,继而影响相关药动学参数:(1)建立生物样本中多西他赛高灵敏度的测定方法,为体内多西他赛的测定做铺垫;(2)考察康艾注射液单次给药对多西他赛注射液在大鼠体内药代动力学参数的影响;(3)考察康艾注射液连续多次给药对多西他赛注射液在大鼠体内药代动力学参数的影响。2方法(1)建立大鼠血浆样品中多西他赛的高效液相测定方法:采用高效液相色谱法检测血浆中多西他赛的浓度,并对所建立的方法进行方法学验证(专属性、灵敏度、精密度、准确度、回收率及稳定性)。(2)康艾注射液对多西他赛注射液在大鼠体内药代动力学研究:分为单次给药和多次给药两种方法。均采用SD大鼠24只雌雄各半,分为高剂量康艾注射液(5.4m L/kg)、中剂量康艾注射液(3.6m L/kg)、低剂量康艾注射液(1.8m L/kg)的实验组和注射同体积生理盐水代替康艾注射液的空白组四个组,每组六只均给多西他赛注射液15mg/kg。其中单次给药实验组清晨尾静脉注射高、中、低剂量的康艾注射液,5分钟后再尾静脉注射多西他赛注射液,空白组是注射生理盐水5分钟后再注射多西他赛注射液。多次给药实验组连续9天尾静脉注射高、中、低剂量康艾注射液,空白对照组连续9天尾静脉注射相同体积生理盐水。第十天实验组和对照组分别给予相应剂量康艾注射液和生理盐水后,5分钟后再尾静脉给予多西他赛注射液。四组均于给药后3min、5min、10min、15min、30min、60min、120min、240min、360min、480min眼底静脉丛采血。用HPLC法测定大鼠体内多西他赛和紫杉醇的面积将面积比带入随行标曲计算血药浓度。经DAS2.0软件计算多西他赛的药代动力学参数,通过IBM SPSS Statistics 21软件分析比较实验组和空白组的药动学参数的变化,从而评价康艾注射液对大鼠体内多西他赛药动学参数的影响。3结果(1)大鼠血浆中多西他赛的线性回归方程为y=0.2293x-0.0272,多西他赛在0.1~30μg/m L浓度范围内呈现良好的线性关系,相关系数r2为0.9992,定量下限LLOQ为0.10μg/m L,日内、日间精密度RSD<15%(n=5);相对回收率>85%(n=5);多西他赛和内标紫杉醇标准储备液在-20℃冰箱放置30天稳定(RE:-5.77%~1.92%);多西他赛血浆样品放置6h后处理及处理后室温放置6h稳定(RE:-5.77%~1.44%);反复冻融3次稳定(RE:-7.69%~7.69%);长期冷冻7天、14天稳定(RE:-11.53%~5.77%)。(2)康艾注射液对多西他赛注射液在大鼠体内药动学参数研究:分别考察了房室模型药代动力学参数(t1/2α、t1/2β、t1/2γ、V1、CL、AUC(0-t)、AUC(0--∞))和非房室模型药动学参数(AUC0-t、AUC0--∞、MRT0-t、MRT0--∞、t1/2z、CLz、Cmax、Vz)。结果显示:(1)单次给药:房室模型参数显示:高剂量组、中剂量组、低剂量组、空白对照组的消除半衰期t1/2γ分别为66.22±6.93(min)、69.32±0(min)、49.23±17.24(min)、67.67±3.67(min),经分析只有低剂量组的t1/2γ明显小于空白对照组,差异有统计学意义。非房室模型参数经分析没有显著性差异。(2)多次给药:房室模型参数显示:高剂量组、中剂量组、低剂量组、空白对照组t1/2γ分别为:56.93±18.89(min)、52.01±16.32(min)、66.32±6.70(min)、69.32±0(min);药时曲线下面积AUC(0-t)分别为:111.86±22.22(mg/L*min)、132.80±26.51(mg/L*min)、120.11±4.90(mg/L*min)、104.20±22.66(mg/L*min)。经分析只有中剂量组的t1/2γ和AUC(0-t)和空白组相比差异有统计学意义。非房室模型统计矩参数显示:高剂量组、中剂量组、低剂量组、空白对照组的药时曲线下面积AUC0-t分别为:103.83±20.37(mg/L*min)、124.059±25.04(mg/L*min)、109.832±4.72(mg/L*min)、95.54±21.14(mg/L*min);药物在体内平均驻留时间MRT0-∞分别为:36.56±11.61(min)、36.75±8.36(min)、39.188±11.85(min)、52.52±10.40(min);消除半衰期t1/2z分别为:33.02±14.20(min)、28.664±5.23(min)、36.88±17.66(min)、51.96±7.53(min);表观分布容积Vz分别为:6.22±1.62(L/kg)、4.87±0.61(L/kg)、6.60±2.86(L/kg)、10.55±2.85(L/kg)。经分析中剂量组和高剂量组的药动学参数MRT0--∞、t1/2z、Vz均比空白对照组显著降低(P<0.05);低剂量组只有Vz比空白组降低(P<0.05)。药时曲线看联合用药组和空白组相比增加了大鼠体内多西他赛AUC(0-t)的量,但是除了中剂量组AUC(0-t)的增加有显著差异(P<0.05),其他组差异都没有统计学意义。4结论本文所建的HPLC方法快速、准确、专属性强、灵敏度相对较高,可用于大鼠体内多西他赛的检测及其他药物与其相互作用的研究。在单次给药康艾注射液时,低剂量康艾注射液与多西他赛注射液联用使大鼠体内多西他赛的消除加快,中、高剂量组没有影响。在多次给药康艾注射液时,低剂量康艾注射液对多西他赛在大鼠体内的表观分布容积有影响,中、高剂量康艾注射液加速了多西他赛在大鼠体内的代谢和消除同时影响了多西他赛在大鼠体内的表观分布。