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目的：探讨丹参酮ⅡA对低氧状态下人肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制作用及血管新生的影响；制备了丹参酮ⅡA-聚乳酸/羟基乙酸微球(TanshinoneⅡA-Polylactic Acid/Glycolic Acid Microspheres，TanⅡA-Ms)，并探讨丹参酮ⅡA微球对肿瘤供血动脉的栓塞作用及药动学和体内组织分布，经肝动脉介入给药对兔VX2肝肿瘤的治疗作用，从肿瘤血管新生方面揭示丹参酮ⅡA微球介入治疗肝癌的机制。
方法：采用CCK-8法检测低氧和常氧条件下丹参酮ⅡA对人肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制作用；实时荧光定量PCR法(RFQ-PCR)及ELISA法检测丹参酮ⅡA对缺氧诱导因子1α(Hypoxia-inducible factor1 alpha，HIF-1α)和血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF) mRNA及蛋白表达的影响。
采用O/W型乳化-液中干燥法制备丹参酮ⅡA微球，以微球形态、粒径、载药量和药物包封率作为含药微球的质量评价指标，同时考察了丹参酮ⅡA微球的体外释药方式。在此基础上，建立兔VX2肝肿瘤模型，观察丹参酮ⅡA微球介入给药后对肿瘤供血动脉的栓塞作用、药动学和体内组织分布情况及对兔VX2肝肿瘤的治疗作用，免疫组化检测HIF-1α、VEGF、MVD的表达。
结果：低氧条件下丹参酮ⅡA对人肝癌SMMC-7721细胞24、48、72h的IC50值分别为12.02、1.03、0.39mg/L，分别是常氧状态下的2.09、8.20、11.38倍。人肝癌SMMC-7721细胞在低氧条件下HIF-1α、VEGFmRNA和VEGF蛋白水平均明显升高(P＜0.01)，但HIF-1αmRNA水平无显著差异(P＞0.05)。丹参酮IA以剂量依赖的方式抑制低氧条件下HIF-1α及VEGF蛋白和VEGFmRNA的表达，但对HIF-1αmRNA表达无影响(P＞0.05)。
采用O/W型乳化-液中干燥法建立了丹参酮ⅡA微球的制备方法，丹参酮ⅡA微球平均粒径在41.15μm，包封率为86.89％，载药量为3.5%，体外释药曲线符合零级释药模式。经肝动脉介入给药后，丹参酮ⅡA微球可栓塞至肝肿瘤供血动脉末梢血管，有效栓塞时间为30-42天。
药动学和体内分布研究结果表明：丹参酮ⅡA微球组与丹参酮ⅡA组相比药物血峰浓度Cmax降低，仅为丹参酮ⅡA组的28%(P＜0.01)，曲线下面积(AUMC)和表观分布容积(Vz)明显增大，半衰期(T1/2)延长了9.76倍，平均滞留时间提高了6.5倍，清除率(CL)减低。两组中各时间点肿瘤组织中丹参酮ⅡA浓度最高，且明显高于肝、心、脾、肺、肾组织中丹参酮ⅡA浓度(P＜0.01)；丹参酮ⅡA溶液组中丹参酮ⅡA浓度代谢很快，在第7天时，肿瘤组织中丹参酮ⅡA药物浓度已基本代谢完全；而微球组中药物在肿瘤组织中持续释放，30天时仍可检测到一定水平的丹参酮ⅡA。相同药物剂量下丹参酮ⅡA以微球的形式给药后，肿瘤组织中丹参酮ⅡA浓度在各时间点都显著高于丹参酮ⅡA组(P＜0.01)。
兔VX2肝肿瘤模型经肝动脉介入给药后，与生理盐水组、等剂量的丹参酮ⅡA组、丹参酮ⅡA加碘油组和空白微球组相比，丹参酮ⅡA微球对肿瘤生长抑制更明显，肿瘤坏死程度更高，且可明显延长动物生存期(P＜0.01)。介入治疗后空白微球组和丹参酮ⅡA加碘油组HIF-1α、VEGF、MVD与生理盐水组和丹参酮ⅡA组相比均明显升高(P＜0.01)，丹参酮ⅡA微球组与空白微球组和碘油加丹参酮ⅡA组相比可明显降低HIF-1α、VEGF、MVD的表达(P＜0.01)。
结论：采用乳化-液中干燥法制备的丹参酮ⅡA微球能够靶向分布于肿瘤组织中缓释药物，可栓塞肿瘤供血动脉42天左右；经肝动脉介入给药后能够抑制兔VX2肝肿瘤的生长，延长荷瘤兔的生存期；栓塞后引起的缺氧环境下丹参酮ⅡA对肝癌细胞的敏感性提高，并可抑制HIF-1α和VEGF的表达，减少肿瘤组织MVD，这可能是丹参酮ⅡA微球介入治疗肝癌的机制之一。