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猴头菇属于齿菌科猴头属,关于猴头菇多糖的研究已有一定的文献报道,但在其脱蛋白方法、结构表征及对透明质酸酶活性的抑制作用等研究上仍有许多空白的地方。本课题以猴头菇为原料,优化了超声辅助提取法,研究了壳聚糖法脱蛋白,表征了猴头菇多糖的分子结构,并研究了猴头菇多糖对透明质酸酶的抑制作用及其初步机理。研究所得的结论如下:(1)在单因素实验的基础上,采用响应面法优化超声辅助提取法提取猴头菇多糖,最佳工艺条件为:超声功率300 W,料液比1:27,超声时间48 min,超声温度90℃,猴头菇多糖得率为8.03±0.46%。正交法优化热水浸提法,得最佳工艺条件:提取温度85℃,料液比1:15,提取时间为5 h,提取3次,猴头菇多糖得率为8.84±0.07%。超声辅助提取法能有效的缩短提取时间。(2)研究了新型的壳聚糖法脱蛋白,其最佳工艺为:料液比50:1,4℃放置2 h;该工艺条件下蛋白去除率为60.11±0.47%,猴头菇多糖损失率为11.16±0.48%,壳聚糖残留率为1.01±0.005%。与Sevage法对比,壳聚糖法的蛋白质去除率提高了11.67%,多糖损失率降低了80.87%。因此,壳聚糖法的脱蛋白效果优于Sevage法。(3)采用DEAE Sepharose Fast Flow柱层析对猴头菇粗多糖进行分离纯化,得到两种成分均一的猴头菇多糖HEP-Ⅰ和HEP-Ⅱ,重均分子量分别为1.72×104 Da和1.03×104 Da。综合红外光谱、单糖组成、高碘酸氧化、Smith降解及核磁共振分析可得,HEP-Ⅰ的主链由α、β型葡萄糖残基和α型半乳糖残基连接组成,侧链由β型鼠李糖残基和β型岩藻糖残基连接组成,且连接于β型葡萄糖残基的C-4;而HEP-Ⅱ的主链是由β型葡萄糖残基和α、β型半乳糖残基连接组成,侧链由β型半乳糖残基、α型鼠李糖残基和α型岩藻糖残基连接组成,连接于β型葡萄糖残基的C-6。X射线衍射、热重分析及刚果红实验分析得两者均为无定型结构,均有两个失重平台,且均不具有三股螺旋构象。(4)HEP-Ⅰ与HEP-Ⅱ均对动物来源的透明质酸酶有抑制作用,为不可逆抑制类型。圆二色光谱分析发现HEP-Ⅰ影响透明质酸酶的整体结构,而HEP-Ⅱ主要影响透明质酸酶的α-螺旋结构;荧光光谱的荧光发射峰强度发生了变化,这些机理研究表明HEP-Ⅰ或HEP-Ⅱ与透明质酸酶发生了相互作用。