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目的:基于肾阳虚外感小鼠模型,以药反证,从代谢组学的角度探索肾阳虚外感证候的生物学本质,以及麻黄细辛附子汤(MXF)干预肾阳虚外感病证的代谢途径和作用环节。方法:采用腹腔注射雌二醇方法复制肾阳虚小鼠模型,H1N1病毒滴鼻感染肾阳虚小鼠,建立肾阳虚外感小鼠模型,进而以中药MXF干预,利巴韦林做阳性药对照;采用LC-TOF/MS对给药前及药物干预一周后小鼠的血清代谢物进行分析,采用LC-Q-E/MS对小鼠肺组织脂质化合物进行分析;采用R语言、MPP、SIMCA-P等软件对数据进行处理,分析模型小鼠血清中代谢物和肺组织中脂质物质的差异性变化、筛选潜在的生物标志物,以及药物干预对潜在标志物的调控作用。采用LC-TOF/MS对MXF水煎液的主要化学成分进行表征。结果:1.通过体重、肛温、自主活动时间、游泳时间、肺指数、死亡率以及肺组织中病毒m RNA的相对表达量判断模型复制成功;中药MXF和利巴韦林干预后,通过对比检测小鼠的肛温、死亡率以及肺组织中病毒m RNA的相对表达量等指标发现,中药MXF对肾阳虚外感病症模型小鼠具有较好的干预作用。2.LC-TOF/MS对不同组小鼠的血清内源性差异物定性分析结果发现,L-Leucine、L-Lactic acid、Sphinganine、Lyso PC(18:0)、5-HETE、Linoleic acid等物质在不同组中都发生了显著性差异,主要涉及亚油酸和花生四烯酸代谢,甘油磷脂代谢和鞘脂代谢,能量代谢等代谢通路;给药干预后,对小鼠血清中内源性差异代谢物具有调控作用。3.LC-QE/MS/MS对肾阳虚外感小鼠肺组织的脂质组学研究发现,小鼠肺组织中主要差异性标志物包括两大类即甘油磷脂类和甘油脂类化合物,包括PC(18:1(9Z)/0:0)、DG(14:0/22:0/0:0)、Lyso PE(22:0/0:0)、TG(15:0/15:0/20:2n6)、TG(16:0/16:0/20:2n6)和TG(15:0/16:0/18:1(11Z))等,主要影响机体的能量代谢和花生四烯酸代谢等代谢通路。MXF干预,对肺组织中主要的差异性脂质类物质有明确的调节作用。4.利用HPLC-TOF/MS技术对52个成分进行了MS表征,其中45个为生物碱成分,利用对照品确定了其中11个化合物的结构;根据精确分子量和碎片信息推断了41个化合物的分子式和可能的结构。结论:复方中药MXF对于肾阳虚外感病症模型小鼠具有良好的治疗作用。MXF对于肾阳虚外感证小鼠异常的下丘脑-垂体-性腺轴、花生四烯酸代谢、能量代谢等代谢通路均具有较好调控作用。脂质类物质是肾阳虚外感模型病证小鼠的一类重要的潜在标志物,MXF可以通过能量代谢途径的代偿性调节,促使其他甘油磷脂类物质趋于正常水平。MXF中主要的药效物质群是生物碱类成分。基于代谢组学的研究方法,从代谢网络调控的整体观出发,阐释肾阳虚外感证的生物学本质及MXF对其干预作用,符合中医治疗疾病和中药作用的整体性原则,在揭示中医“证候”本质、方剂整体疗效的作用机制研究方面具有独特的优势。