论文部分内容阅读
目的: 1、观察C225联合放疗对MGC803、BGC823胃癌细胞株生长抑制的影响,并评价两者的联合效应;2、观察C225联合放疗对MGC803、BGC823胃癌细胞株细胞周期及细胞凋亡的影响;3、观察C225联合放疗对MGC803、BGC823胃癌细胞株EGFR信号通路蛋白表达的影响;4、根据实验结果,初步探明C225与放疗联合效应的可能机制。方法:1、将MGC803和BGC823胃癌细胞株在37℃、5%C02条件下进行培养。待肿瘤细胞呈对数生长时,接种于96孔板,设空白对照组、单用C225、单用放疗组、C225联合放疗组,应用MTT法检测各组细胞增殖情况。单用C225组中,C225浓度分别为0.1 ug/ml、1 ug/ml、10 ug/ml、100 ug/ml及1000 ug/ml。单用放疗组X线剂量分别为2、4及6Gy。联合组中先给予20ug/ml的C225,24小时后给予2 Gy、4 Gy及6Gy的X线处理,计算Q值以评价两者联合效应。2、将呈对数生长的肿瘤细胞接种于6孔培养板,设空白对照组、单用C225组、单用放疗组和C225联合放疗组,其中后两组在给予C225的24小时后给予4Gy的X线照射,应用流式细胞仪检测四组的细胞周期及凋亡的情况。3、将呈对数生长的肿瘤细胞接种于6孔培养板,设空白对照组、C225组、单纯放疗组和联合组,其中后两组在给予C225的24小时后给予4Gy的X线照射,应用Western-Blotting法检测四组EGFR、p-Akt及p-p38MAPK表达变化情况。结果:1、单用C225对MGC803、BGC823细胞株具有抑制增殖的作用。在0.1ug/ml-1000 ug/ml浓度范围内,随着C225浓度逐渐增大,肿瘤细胞的OD值逐渐下降,与对照组相比具有统计学差异,肿瘤细胞生长的抑制率逐渐增加,呈明显量效关系。单用放疗对MGC803和BGC823细胞株具有抑制增殖的作用。随着X线的照射剂量由2-6Gy不断增大,肿瘤细胞的OD值逐渐下降,与对照组相比具有统计学差异,肿瘤细胞生长的制率逐渐增加,呈明显量效关系。2、当C225联合放疗时,可显著抑制MGC803和BGC823胃癌细胞株的增殖,两者具有协同作用。3、当C225联合放疗时,可使MGC803和BGC823胃癌细株细胞周期受阻,进入G0/G1期细胞比例明显增加,而S期的细胞比例明显减少,并且能显著促进肿瘤细胞的凋亡。4、C225与放疗联合应用时,可使MGC803、BGC823胃癌细胞株EGFR信号通路相关蛋白EGFR、p-Akt及p-p38MAPK表达减少。结论:1、当C225与放疗联合应用时,可增强对MGC803、BGC823胃癌细胞株的的生长抑制效应,两者具有协同作用。2、C225与放疗联用时产生的协同效应可能与以下机制有关:两者联合作用后,EGFR信号传导通路受到明显抑制,G0/G1期细胞比例显著增多,S期的细胞显著减少,肿瘤细胞的凋亡显著增加。