H9N2亚型禽流感在全世界广泛流行，给养殖业带来了巨大的经济损失。该亚型最初只在禽类中传播，后来人们发现它也可以直接感染哺乳动物，具有重要的公共卫生学意义。本研究通过对H9N2亚型禽流感病毒的分离、HA基因的克隆及遗传变异分析，以了解近年来H9N2亚型禽流感病毒的变异规律，主要获得以下成果：1、从河南洛阳、陕西咸阳地区的养殖场，临床疑似禽流感发病的鸡群中采集病料，通过鸡胚接种传代，血凝试验和RT-PCR鉴定的方法，先后分离到5株H9N2亚型禽流感病毒，分别命名为LY35、LY36、LY48、LY49、XY。2、参照GenBank中收录的HA基因序列，合成两对引物，采用RT-PCR法扩增LY36、XY株H9N2亚型禽流感病毒的HA基因，经克隆测序后，进行序列拼接，获得这两株病毒的全长HA基因序列并上传到Genbank，登陆号分别为KF638574、KF638575。3、运用DNAStar软件将LY36、XY株H9N2亚型禽流感病毒的HA基因序列与Genbank收录的参考毒株进行比对分析，并用MEGA6软件绘制系统进化树。结果表明，LY36、XY株H9N2亚型禽流感病毒的核苷酸同源性为97.1%，均属于BJ/94-like分支的Y280-like小分支。这两株病毒的HA裂解位点附近的氨基酸序列均为PSRSSR/GL，符合低致病性禽流感病毒的特点。LY36、XY株H9N2亚型AIV的HA基因的324位氨基酸均由谷氨酰胺(Q)突变为亮氨酸(L)，且均在313位增加了一个糖基化位点，这可能会影响病毒的毒力及宿主特异性。综上所述，本实验所分离的LY36、XY株H9N2亚型禽流感病毒是我国近年来主要流行株，但其在基因水平上产生了一定程度的变异。