【摘 要】
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目的:探索水通道蛋白-3对肠黏膜屏障功能的保护作用。方法:128只雄性Balb/c小鼠,48只随机分成4组,每组:假手术组(n=6)、假手术+口服甘油组(n=6)、脓毒症组(n=30,其中24只分别于建模后Oh、6h、12h和24h处死,每个时点6只)、脓毒症+口服甘油组(n=6)。另外80只平均分配于四组用于观察小鼠生存情况。除时间依赖组,四组建模后24h处死,收集血液和肠组织标本。采用盲肠结扎
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目的:探索水通道蛋白-3对肠黏膜屏障功能的保护作用。方法:128只雄性Balb/c小鼠,48只随机分成4组,每组:假手术组(n=6)、假手术+口服甘油组(n=6)、脓毒症组(n=30,其中24只分别于建模后Oh、6h、12h和24h处死,每个时点6只)、脓毒症+口服甘油组(n=6)。另外80只平均分配于四组用于观察小鼠生存情况。除时间依赖组,四组建模后24h处死,收集血液和肠组织标本。采用盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型。采用苏木素-伊红染色观察肠粘膜的形态学变化,同时采用酶联免疫吸附测定二胺氧化酶和肠型脂肪酸结合蛋白血浆浓度水平;免疫组化、实时荧光定量聚合酶链式反应及蛋白印记测定肠黏膜水通道蛋白-3和紧密连接蛋白中闭合蛋白(occludin)的表达。结果:苏木素-伊红染色显示,脓毒症诱导的肠道绒毛皱缩紊乱(P<0.05),且血浆二胺氧化酶和肠脂肪酸结合蛋白浓度(P<0.05)升高。与此同时,肠道水通道蛋白-3和紧密连接蛋白中闭合蛋白(occludin)表达随着损伤的加重表达明显下调(P<0.05)。口服甘油实验替代补充水通道蛋白-3功能部分改善了脓毒症诱导的肠粘膜损伤,一方面肠黏膜形态结构损伤改善(P<0.05),另一方面DAO和FABP2的血浆浓度降低(P<0.05);除此之外紧密连接蛋白中闭合蛋白(occludin)表达上调;口服甘油实验改善了脓毒症小鼠死亡率(P<0.05)。结论:脓毒症肠损伤过程中,水通道蛋白-3和紧密连接蛋白中闭合蛋白(occludin)表达下调,而作为水通道蛋白-3替代作用的口服甘油实验可以部分改善肠损伤,部分提高脓毒症小鼠生存率。本实验初步提示水通道蛋白-3可能对脓毒症的肠道有保护作用,改善脓毒症的预后。
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