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农业害虫(Insect Pests,IPs)是制约作物增产的重要因子之一。作物保护旨在防止和避免农业害虫造成的损失。长期以来,育种家和植保科学家一直奋斗于寻求更好的方法应对农业害虫危害,并创制了大量技术、方法,各种技术均对病虫害防治有着重要贡献,但不同技术也同时伴随着各种局限。目前,农药是控制农业害虫危害最有效和最简单的方法。杀虫剂在高效控制农业害虫的同时,通常伴随着严重环境污染和生态破坏。目前,虽然已有大量工作报道杀虫剂对植物和动物的直接危害,但是其是否直接影响植物生理、代谢过程鲜有研究。
在本研究中,我们在营养阶段给水稻喷了2次种不同类型商业杀虫剂阿维菌素(Abamectin,ABM)和噻虫嗪(Thiamethoxam,TXM)。随后,利用高通量测序技术对各样本基因表达水平进行检测。在ABM处理下,共鉴定到470个基因发生差异表达(DEG),GO富集分析发现这些基因主要参与多个重要生物学过程,包括环境应激响应、信号传递和蛋白代谢等。与ABM相比,TXM对植物内源性代谢过程的影响略大。在TXM处理的水稻中,我们检测到670个DEGs。其中,504个基因为TXM特异诱导差异表达基因,这些基因富集于多种GO terms和细胞过程,与TXM的广谱特征紧密相关。剩余166个DEGs在两种农药处理下均显著差异表达。此外,比较分析农药处理后不同时间节点,我们发现与3h和3d相比,1d诱导的DEGs数量最多,表明农药对基因表达没有长期持续影响。两种农药处理诱导有限的DEGs,表明农药不会显着影响水稻的生产性能。
作为植物发育激素,生长素在植物生长和发育过程中起着重要作用。在本研究中,我们发现ABM调节部分生长素响应基因,包括1个生长素外排载体基因(Os01g69070)、3个生长素抑制基因(Os03g22270、Os11g44810和Os08g35190)和2个生长素响应基因(Os06g45970、Os02g07110),表明ABM可能会影响水稻中的生长素信号。
除了用于解析DEGs,RNA-seq也是分析基因可变剪接(AS)的重要资源。数据分析发现,在两种农药处理下,共鉴定到274个DE AS,涉及270个基因。其中,ABM和TXM处理下分别有178和167个DE AS事件。我们将DE AS分为四类,外显子跳跃(ES)丰富最高(67.15%),其次是可变3剪接位点(A3SS)(20.44%),内含子保留(IR)和可变5剪接位点(A5SS)比例最少,仅占总体的6.93%和5.47%。随后,我们使用MapMan分析将DE AS进行注释,发现它们显著富集于RNA和蛋白质代谢。选择性剪接伴随着宿主基因表达的改变,说明基因可变剪切也是植物响应农药处理的重要途径。
长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是生物体基因表达中另一个重要调控因子,本研究发现部分lncRNA也受两种农药诱导。在ABM和TXM处理下,我们共检测到83个lncRNA(DELs)显著差异表达。部分LncRNA可充当miRNA“海绵”以调控蛋白质编码基因的表达,例如,我们鉴定到lncRNA TU9050A和TU38959通过miRNA的海绵活性诱导其相邻编码基因的表达。TE插入是除lncRNA之外的植物中基因表达的另一个重要贡献者。我们在ABM和TXM处理下共鉴定到193和387 DE TEs,其中,92个DE TEs在两种农药处理下均显著差异表达。与随机TEs相比,DE TEs在基因附近显著丰富,表明DE TEs可能通过参与调控邻位基因或1cRNA表达而响应农药处理。综上,本研究可为有效使用农药防治病虫害提供一定参考。
在本研究中,我们在营养阶段给水稻喷了2次种不同类型商业杀虫剂阿维菌素(Abamectin,ABM)和噻虫嗪(Thiamethoxam,TXM)。随后,利用高通量测序技术对各样本基因表达水平进行检测。在ABM处理下,共鉴定到470个基因发生差异表达(DEG),GO富集分析发现这些基因主要参与多个重要生物学过程,包括环境应激响应、信号传递和蛋白代谢等。与ABM相比,TXM对植物内源性代谢过程的影响略大。在TXM处理的水稻中,我们检测到670个DEGs。其中,504个基因为TXM特异诱导差异表达基因,这些基因富集于多种GO terms和细胞过程,与TXM的广谱特征紧密相关。剩余166个DEGs在两种农药处理下均显著差异表达。此外,比较分析农药处理后不同时间节点,我们发现与3h和3d相比,1d诱导的DEGs数量最多,表明农药对基因表达没有长期持续影响。两种农药处理诱导有限的DEGs,表明农药不会显着影响水稻的生产性能。
作为植物发育激素,生长素在植物生长和发育过程中起着重要作用。在本研究中,我们发现ABM调节部分生长素响应基因,包括1个生长素外排载体基因(Os01g69070)、3个生长素抑制基因(Os03g22270、Os11g44810和Os08g35190)和2个生长素响应基因(Os06g45970、Os02g07110),表明ABM可能会影响水稻中的生长素信号。
除了用于解析DEGs,RNA-seq也是分析基因可变剪接(AS)的重要资源。数据分析发现,在两种农药处理下,共鉴定到274个DE AS,涉及270个基因。其中,ABM和TXM处理下分别有178和167个DE AS事件。我们将DE AS分为四类,外显子跳跃(ES)丰富最高(67.15%),其次是可变3剪接位点(A3SS)(20.44%),内含子保留(IR)和可变5剪接位点(A5SS)比例最少,仅占总体的6.93%和5.47%。随后,我们使用MapMan分析将DE AS进行注释,发现它们显著富集于RNA和蛋白质代谢。选择性剪接伴随着宿主基因表达的改变,说明基因可变剪切也是植物响应农药处理的重要途径。
长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是生物体基因表达中另一个重要调控因子,本研究发现部分lncRNA也受两种农药诱导。在ABM和TXM处理下,我们共检测到83个lncRNA(DELs)显著差异表达。部分LncRNA可充当miRNA“海绵”以调控蛋白质编码基因的表达,例如,我们鉴定到lncRNA TU9050A和TU38959通过miRNA的海绵活性诱导其相邻编码基因的表达。TE插入是除lncRNA之外的植物中基因表达的另一个重要贡献者。我们在ABM和TXM处理下共鉴定到193和387 DE TEs,其中,92个DE TEs在两种农药处理下均显著差异表达。与随机TEs相比,DE TEs在基因附近显著丰富,表明DE TEs可能通过参与调控邻位基因或1cRNA表达而响应农药处理。综上,本研究可为有效使用农药防治病虫害提供一定参考。