FK1706促进周围神经再生作用的实验研究

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目前已知FK506是一种免疫抑制剂,具有显著促进神经再生作用,但其免疫抑制作用限制了其在周围神经损伤修复中的应用。按照去除其免疫抑制结构设计的衍生物FK1706的是否有促进神经再生作用,尚未明了。本研究通过建立大鼠坐骨神经损伤神经移植与神经旁路移植模型,术后应用FK1706,探讨其对修复神经的再生作用。实验分为以下2个部分。第一部分神经移植术后FK1706促进神经再生作用的实验研究目的:探讨神经移植后FK1706促进神经再生作用。方法:SD大鼠20只,雄性,250-300g,随机分为实验组(FK1706组)和对照组。两组麻醉后,取左侧桡神经10mm备用,显露左侧坐骨神经干,于梨状肌下0.5cm处,用刀片整齐切除8mm长的坐骨神经,将桡神经移植于坐骨神经上,两断端分别行端端吻合。实验组术后当天开始左下肢局部肌肉注射FK1706(0.32mg/kg),持续8周。对照组神经移植术后不做干预,常规喂养。8周后行大鼠左坐骨神经神经电生理检测、左坐骨神经再生有髓神经纤维数及截面积测定、左腓肠肌肌湿重及肌纤维截面积测定。结果:1.实验组复合运动动作电位(CMAP)的波幅7.34±1.22mV,对照组6.07±1.18mV,相比差异有显著性(P<0.05)。实验组运动神经传导速度(MNCV)6.07±0.95m/s,对照组3.78±0.46m/s,相比差异有显著性(P<0.01)。2.实验组有髓神经纤维数近端1199.53±113.73根,远端701.17±78.40根,远端纤维截面积22.53±6.52μm2,对照组有髓神经纤维数近端1164.73±71.39根,远端532.78±100.68根,远端纤维截面积14.39±3.13μm2,近端有髓神经纤维数相比差异无显著性(P>0.05),远心端有髓神经纤维数、远端纤维截面积相比差异有显著性(P<0.01)。3.实验组再生有髓神经纤维的髓鞘厚度(mt)0.1523±0.0520μm,再生纤维的直径比(d/D)0.6364±0.1199,对照组再生有髓神经纤维的髓鞘厚度(mt)0.1017±0.0773,再生纤维的直径比(d/D)0.4969±0.1396,相比差异有显著性(P<0.05)。4.实验组腓肠肌肌湿重805.91±98.82mg,对照组腓肠肌肌湿重702.26±78.46mg,相比差异有显著性(P<0.05)。实验组肌纤维截面积323.81±34.51μm2,对照组肌纤维截面积213.68±45.77μm2,相比差异有显著性(P<0.01)。结论:FK1706能显著改善大鼠神经移植术后运动神经传导速度,增加吻合口远端再生有髓神经纤维数及截面积,增加患肢腓肠肌肌湿重及肌纤维截面积。FK1706具有显著促进大鼠神经移植术后神经再生作用。第二部分神经旁路移植术后FK1706促进神经再生的实验研究目的:探讨神经旁路移植后FK1706促进神经再生作用。方法:SD大鼠20只,雄性,250-300g,随机分为实验组(FK1706组)和对照组。两组麻醉后,取左侧桡神经10mm备用,显露左侧坐骨神经干,用显微镜持针钳钳夹其中点10s,于钳夹点近、远端3mm处神经外膜上,分别开一张直径为1.5mm的窗口,将桡神经与两窗口作端侧吻合。实验组术后当天开始左下肢局部肌肉注射FK1706(0.32mg/kg),持续8周。对照组神经旁路移植术后不做干预,常规喂养。8周后行大鼠左坐骨神经神经电生理检测、左坐骨神经再生有髓神经纤维数及截面积测定、左腓肠肌肌湿重及肌纤维截面积测定。结果:1.实验组复合运动动作电位(CMAP)的波幅6.69±0.89mV,对照组5.32±0.80mV,相比差异有显著性(P<0.01)。实验组运动神经传导速度(MNCV)5.98±1.14m/s,对照组4.32±0.53m/s,相比差异有显著性(P<0.01)。2.实验组有髓神经纤维数近端1131.67±45.28根,远端708.52±39.85根,远端纤维截面积20.68±6.95μm2,对照组有髓神经纤维数近端1020.70±55.22根,远端468.87±119.67根,远端纤维截面积13.29±2.39μm2,近端有髓神经纤维数相比差异无显著性(P>0.05),远心端有髓神经纤维数、远端纤维截面积相比差异有显著性(P<0.01)。3.实验组再生有髓神经纤维的髓鞘厚度(mt)0.1566±0.0659μm,再生纤维的直径比(d/D)0.6269±0.1094,对照组再生有髓神经纤维的髓鞘厚度(mt)0.1022±0.0458,再生纤维的直径比(d/D)0.5101±0.1294,相比差异有显著性(P<0.05)。4.实验组腓肠肌肌湿重753.54±105.91mg,对照组腓肠肌肌湿重598.02±65.02mg,相比差异有显著性(P<0.01)。实验组(FK1706组)肌纤维截面积246.55±50.41μm2,对照组肌纤维截面积178.90±33.59μm2,相比差异有显著性(P<0.01)。结论:FK1706能改善大鼠神经旁路移植术后运动神经传导速度,增加吻合口远端再生有髓神经纤维数及截面积、腓肠肌肌湿重及肌纤维截面积。FK1706具有促进大鼠神经旁路移植术后移植神经再生的作用。
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