【摘 要】
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目的:近年来有研究表明经相同的化疗过程后,survivin表达阴性的患者临床症状及病理表现缓解率均高于survivin表达阳性的患者,这说明survivin基因的表达可能与肿瘤对化疗药物
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目的:近年来有研究表明经相同的化疗过程后,survivin表达阴性的患者临床症状及病理表现缓解率均高于survivin表达阳性的患者,这说明survivin基因的表达可能与肿瘤对化疗药物的敏感性有关,但其具体机制目前还未完全阐明。本实验通过构建survivin反义核酸,研究其在胃癌化疗中对表阿霉素的增敏作用及可能的作用机制方法:设计并构建survivin反义寡核酸链(ASODN)及正义寡核酸对照链,采用脂质体法转染胃癌SGC-7901细胞, MTT法检测转染组细胞抑制率并筛选出适宜浓度,不同浓度表阿霉素处理胃癌SGC-7901细胞,,MTT法检查表阿霉素对其生长抑制作用,筛选出对SGC-7901细胞生长抑制率较低的4组浓度做为待测浓度,将2种因素联合作用于SGC-7901细胞,Western-blot法检查survivin蛋白表达情况,MTT法检查表阿霉素对其抑制率,流式细胞仪检查细胞周期,Annexin V-FITC法检查细胞凋亡情况,RT-PCR法检查bcl-2、SMac mRNA表达情况。结果:经200nm/L ASODN反义核酸处理后的SGC-7901细胞对表阿霉素的敏感性明显增加:MTT法示转染后细胞经表阿霉素作用24h后,抑制率较单独使用表阿霉素的未转染组明显提高(P<0.05,q>1.15),流式细胞仪检查示联合作用组使细胞G2/M期细胞数较单独使用表阿霉素组明显增多:western-blot检查示转染后survivin蛋白表达水平显著降低,Annexin V-FITC检查示转染组细胞凋亡明显增加,RT-PCR检查示:SMac mRNA在联合作用组较空白对照组表达上调结论: Survivin反义核酸能够增强SGC-7901细胞对表阿霉素的敏感性,增强其在低浓度下对胃癌SGC-7901细胞的细胞毒作用,延长细胞周期,其作用可能是籍由上调SMac的表达实现的。
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