纤维蛋白凝胶复合rhBMP2及骨髓基质干细胞应用于兔脊柱融合的实验研究

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前言 脊柱融合(Spinal Fusion)是治疗脊柱疾病的主要方法之一,而横突间脊柱融合是脊柱融合的常用方法。目前,临床上常利用自体骨或同种异体骨移植来进行脊柱融合,但是,由于脊柱融合需骨量大,自体骨很难满足临床需要,另外,自体骨还存在塑形困难,术中出血量增多,术后供区疼痛等缺点,而异体骨移植也存在排斥反应,疾病传播等缺点。 组织工程骨应包括三个基本要素:(1)理想的种子细胞,(2)合适的载体,(3)成骨诱导物。骨髓基质干细胞(Marrow Stromal Stem Cells)又称间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)是组织工程的理想种子细胞。骨形态发生蛋白(Bone Morphogenetic Protein, BMP)能够诱导MSCs向成骨细胞分化。纤维蛋白凝胶(Fibrin Glue, FG)是MSCs和BMP的合适载体。 本实验采用FG、MSCs及rhBMP2(以下简称BMP)构建组织工程骨,进行兔横突间脊柱融合。通过影像学、生物力学及组织学等方法检测脊柱融合情况,以期为脊柱融合提供更为有效的方法。 方法 一、动物来源 一月龄(体重0.5-1Kg)及一岁龄(体重3-5Kg)健康日本大耳白兔(不分雌雄),由中国医科大学动物部提供并饲养。 二、MSCs的体外培养和诱导分化 利用密度梯度离心法分离获取幼兔股骨MSCs,以1×10~6/ml接种于培养瓶中,3天后第一次换液,以后隔天换液。待原代培养细胞融合成单层后,1:3传代培养,传代培养时使用条件培养液,其中含10%胎牛血清,VitC
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