水飞蓟快速繁殖体系的建立

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水飞蓟Silybum marianum(L.)Gaertn.属菊科水飞蓟属,是一至二年生草本植物,原产于南欧和北非,在我国西北、华北地区广泛引种栽培,其果实入药。功能是清热解毒、保肝、利胆、保脑、抗X射线。主治急性或慢性的肝炎、肝硬变、脂肪肝、代谢中毒性肝损伤、肝石症、胆管炎及肝胆管周围炎等症,都有良好的疗效。此外,它的种子含油量一般为28%~36%,是含氮、磷、钾较高的植物,茎叶中含氮1.54%,含磷0.33%,粗蛋白11%,营养价值高,食用此油能防止动脉硬化。苗期可做菜用,能在早春露地种植食用。本论文主要阐述了通过组织培养得到大量水飞蓟再生植株的过程。其中,水飞蓟种子经8s酒精灭菌,25mmin升汞灭菌后,用无菌水冲洗6次之后接种在B5培养基中培养7d得到无菌苗,待用。以待用无菌苗培养愈伤组织,首先设计选用愈伤组织培养基为:改良White+NAA1.0+6-BA0.5+ZT0.5mg/L:B5+NAA1.0+6-BA0.5+ZT0.5mg/L;N6+NAA1.0+6-BA0.5+ZT0.5mg/L和1/2MS+NAA1.0+6-BAO.5+ZT0.5mg/L这4种愈伤组织培养基中,实验结果表明:以B5和1/2MS为基础培养基的愈伤组织诱导效果较好,其它培养基次之;通过继代培养筛选出最适愈伤组织培养基为:B5+NAA1.0+6-BA0.5+ZT0.5mg/L。用最适培养基和愈伤组织为基础材料,进行愈伤组织的继代培养和大量增殖。在继代培养过程中,对激素用量逐渐进行调整降低,愈伤组织性状也逐渐稳定。以实验筛选出的性状较稳定的愈伤组织为基础材料,通过激素处理诱导愈伤组织再分化形成再生植株。经实验筛选,最适不定芽培养基为B5+NAA1.0+6-BAO.5mg/L,最适不定根培养基为B5+NAA1.0mg/L由于愈伤组织、芽和根诱导过程受外界因素的影响较大,所以研究了在诱导芽和根发生的过程中,外界因素例如:植物激素、温度、光照和培养基的pH值对愈伤组织、芽和根诱导率以及对愈伤组织的增殖,芽和根生长的影响,从而筛选出最适宜的培养基。经过试验发现:植物激素NAA、6-BA、ZT对于愈伤组织诱导有明显的促进作用,在附加了一定浓度NAA、6-BA和ZT的B5基本培养基中,诱导率都有明显的提高。但当三种激素浓度过高或过低时,诱导率则开始降低,甚至会产生抑制作用。植物激素NAA和6-BA对于不定芽诱导有明显的促进作用,在附加了一定浓度的NAA和6-BA的B5基本培养基中,诱导率都有明显的提高。植物激素NAA对于不定根的诱导有明显的促进作用。在附加了定浓度的NAA的B5基本培养基中,不定根的诱导率有明显的提高;但当NAA浓度大于或小于1.0mg/L时,诱导率则开始降低,甚至抑制根的诱导。经实验表明,适当浓度的激素对愈伤组织、芽和根的诱导都有明显的促进作用。
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