论文部分内容阅读
目的:探讨经肌肉注射途径移植人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)对阿霉素扩张型心肌病大鼠的治疗效应及对心肌微血管再生的影响。方法:100只SPF级健康SD大鼠随机分为2组:正常对照组(15只)和扩张型心肌病组(简称DCM组,85只)。DCM组大鼠采用2mg/kg阿霉素每周1次,连续8周建立扩张型心肌病模型。模型建立成功2周后,成活的60只大鼠随机分为DCM模型对照组(DMEM组,2ml DMEM);h UC-MSCs低剂量组(低剂量组,1×106 h UC-MSCs);h UC-MSCs高剂量组(高剂量组10×106 h UC-MSCs)。干细胞治疗4周后,心脏超声评估大鼠心功能;酶联免疫竞争法(EIA)检测血浆BNP水平;免疫组化标记CD34检测心肌微血管密度以及电镜观察微血管结构;实时定量PCR检测心肌Slit-2、Robo-1与Robo-4表达水平,Western blot检测心肌HGF、LIF及VEGF蛋白含量。结果:在h UC-MSCs移植4周后,心脏超声提示低剂量组与高剂量组大鼠左室射血分数(LVEF)与治疗前对比明显上升[(66.10±1.93)%至(72.27±2.44)%,P<0.01;(66.31±2.97)%至(70.92±2.68)%,P<0.01];左室短缩率(LVFS)前后对比也出现上升[(31.00±1.71)%至(34.96±2.08)%,P<0.05;(31.57±2.45)%至(33.49±2.19)%,P<0.05)];DMEM组大鼠LVEF、LVFS均呈下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。大鼠血浆BNP水平明显下降,低剂量组由(352.68±41.25)pg/ml至(202.68±20.38)pg/ml,P<0.01;高剂量组由(355.79±48.32)pg/ml至(193.62±15.41)pg/ml,P<0.01;DMEM组则继续上升,由(365.42±61.81)pg/ml至(431.26±52.80)pg/ml,P<0.05。低剂量组与高剂量组大鼠心肌微血管密度与DMEM组对比也明显增多[(84.00±19.18)/mm2与(86.67±20.88)/mm2比(27.14±13.97)/mm2,P<0.01],DMEM组与正常组大鼠对比无明显差异[(27.14±13.9)/mm2 vs(16.43±5.71)/mm2,P>0.05)];给予不同剂量h UC-MSCs移植的大鼠电镜下心肌微血管的损害程度均要轻于给予DMEM注射的大鼠。与DMEM组大鼠对比给予h UC-MSC移植的大鼠心肌Slit-2与Robo-1的表达水平明显升高;而Robo-4在各组大鼠间表达水平均差异均无统计学意义。HGF、VEGF与LIF在低剂量组与高剂量组大鼠心肌含量均高于DMEM组(P<0.01)。结论:肌肉注射h UC-MSCs能够明显改善阿霉素诱导的DCM大鼠心脏功能;并且可以上调Slit-2、Robo-1、HGF、LIF与VEFG在大鼠心肌中的表达促进大鼠心肌微血管再生。h UC-MSCs可能通过旁分泌大量细胞因子从而发挥对心脏疾病的治疗效应。