黄连生物碱对解偶联蛋白2的影响

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糖尿病及其并发症已成为世界范围内严重的公共健康问题。现代研究表明,糖尿病及其并发症的发生和发展与氧化应激密切相关。而作为细胞活动“动力工厂”的线粒体在能量代谢中占据十分重要的位置,同时也与细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)的生成与清除密切相关。解偶联蛋白2(uncoupling protein2, UCP2)为线粒体内膜上的质子转运蛋白,分布广泛。UCP2具有很高的质子转运活性,能使质子直接进入线粒体基质而不产生ATP,从而消耗储存在质子电化学势能中的自由能,避免了活性氧的产生。黄连是一种传统中药,其使用历史悠久,药理广泛。本论文对黄连中四种主要生物碱体内外实验对于靶点UCP2的作用及抗氧化活性进行研究,并根据它们的化学结构来探索其作用机制,本实验的开展将为黄连的进一步利用做好理论基础。(1)四种生物碱影响体外UCP2表达及抗氧化活性研究通过线粒体抗氧化、细胞抗氧化以及蛋白免疫印迹实验,测定黄连生物碱对H2O2自由基的清除能力,细胞内活性氧、SOD酶活力的影响以及对UCP2表达的影响。对结果进行对比分析,米研究四种生物碱对UCP2表达的影响及抗氧化活性的关系。结果如下:(1)促进UCP2表达量的对比:黄连碱最强,小檗碱次之,巴马汀与表小檗碱作用不明显(2)抗氧化活性:①四种生物碱于体外线粒体清除H202自由基及细胞内抑制活性氧的生成,都有效果,说明四种生物碱都具有抗氧化的作用。结果说明:黄连生物碱促进UCP2蛋白表达,抑制ROS生成。(2)四种生物碱影响体内UCP2表达及抗氧化活性研究通过四个月KK小鼠喂养实验,测定小鼠体重、UCP2表达量及小鼠血清SOD酶活力,分析四种黄连生物碱的体内抗氧化活性与UCP2表达的关系。结果显示:黄连生物碱于SOD酶的作用不明显,而上调UCP2的表达明显。
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