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[目的]研究表皮生长因子受体介导的靶向性非病毒载体GE7基因转移系统介导细胞周期调节基因p21WAF-1/CIPl对体外培养的人脑胶质瘤细胞和裸鼠荷人脑胶质瘤模型的治疗效应。 [方法]构建靶向性非病毒载体GE7基因转移系统，分别与β-gal报道基因、细胞周期调节基因p21WAF-1/CIPl组成多肽/DNA载体四元复合物。应用免疫组化法检测中国人脑胶质瘤组织及瘤周组织EGF-R的表达水平；免疫组化法检测人脑胶质瘤细胞株U87MG、U251MG和大鼠胶质瘤细胞株C6表面EGF-R的表达，筛选EGF-R高表达的胶质瘤细胞株，作为外源基因转染的靶细胞。β-gal报道基因体外转导U251细胞，X-gal组化染色分析GE7基因转移系统的体外导入效率；p21WAF-1/CIPl基因体外转导U251细胞，应用MTS法观察细胞生长抑制情况：提取细胞DNA，琼脂糖凝胶电泳检测DNA凋亡梯带；流式细胞仪分析细胞周期变化：免疫组化法及PT-PCR法检测转染细胞p21WAF-1/CIPl基因的表达。U251细胞悬液皮下接种，建立裸鼠皮下荷人脑胶质瘤动物模型，观察成瘤率；免疫组化法检测皮下肿瘤组织EGF-R的表达；采用经瘤周注射和经尾静脉注射两种途径导入DNA载体四元复合物，动态观察肿瘤组织体积变化，绘制肿瘤生长曲线；治疗结束后处死动物，取肿瘤组织称重，计算抑瘤率；肿瘤组织行大体和光镜下病理学检查；提取肿瘤组织DNA，琼脂糖凝胶电泳检测DNA凋亡梯带；免疫组化法探讨外源基因在体内的表达情况。 [结果]人脑胶质瘤组织及瘤周组织EGF-R的表达水平分别为70.3％和32.4％，人脑胶质瘤组织中存在表皮生长因子受体基因的过度表达；人脑胶质瘤组织EGF-R的表达水平与肿瘤级别呈正相关；人脑胶质瘤细胞株U251MG表面EGF-R的表达呈强阳性，筛选为外源基因转染的靶细胞。β-gal报道基因体外转导U251细胞，24小时即有外源基因的表达，72小时为表达高峰，表达率约为70%，表达时程延续约1周；转导细胞周期调节基因p21WAF-1/CIPl，对肿瘤细胞体外生长有明显的抑制作用，细胞生长曲线呈低平型；提取细胞DNA经第二军医大学博土论文 中文摘要琼脂糖凝胶电泳出现典型的0M凋亡梯带：经MG分析细胞周期停滞于GI期，GZ期细胞数量明显减少；经免疫组化法及 PT－PCR法检测，转染细胞 PZI’‘’－’‘”’‘基因的表达明显高于对照组。U251细胞皮下接种建立裸鼠荷人脑胶质瘤动物模型，成瘤率为100％，皮下肿瘤EGF－R的表达水平与U251细胞体外生长时相近；采用经瘤周注射和经尾静脉注射两种方法导入DNA载体四元复合物，均可明显抑制肿瘤组织生长，诱导肿瘤细胞发生凋亡，两种给药途径肿瘤抑制率无显著差异；免疫组化法检测，外源基因转导后能在体内稳定地表达。 ［结论］表皮生长因子受体介导的GE7基因转移系统，具有较高的基因转移效率和靶向性，经肿瘤局部和全身途径给药，转导 PZI’‘’－’／””基因，均可诱导肿瘤细胞凋亡，明显抑制肿瘤生长。本实验为脑胶质瘤基因治疗提供了一种新的导入途径，并为进一步建立裸鼠荷人脑胶质瘤原位模型和经静脉途径导人外源基因治疗人脑胶质瘤提供了实验基础。