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背景及目的:近年来随着我国人民物质生活条件的改善和生活方式的改变,高尿酸血症的患病率呈现升高趋势。高尿酸血症(Hyperuricemia)是由嘌呤代谢障碍所致的一种代谢性疾病,高尿酸血症不仅仅是痛风的病因,而且与慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)、心血管疾病、高血压、代谢综合征(Metobolic syndrom)的发生密切相关。二十世纪七十年代Ross等人提出了“内皮细胞功能障碍”假说,他们提出血管内皮细胞功能障碍是血管内皮受损之后,内皮细胞合成的各种细胞因子发生改变,局部炎症反应活跃,血管通透性增加,血管的收缩/舒张失衡。血管内皮功能障碍在高血压、心血管疾病和慢性肾脏病的发生中起到了重要的作用。但是高尿酸血症对血管内皮细胞的影响及其具体致病机制尚未明确,本研究拟探讨不同尿酸浓度对肾小球内皮细胞的影响及其可能的机制,为临床上定期监测,早期预防及治疗高尿酸血症提供理论基础。方法:1、以人的肾小球内皮细胞(HRGEC)为实验对象,经CCK-8细胞毒性实验检测,选择尿酸的作用浓度。2、不同浓度(0、4、8、16 mg/dl)的尿酸作用于HRGEC 24小时,Real-timePCR法、Western blotting法分别检测eNOS、NF-κB p65、MCP-1、ICAM-1的表达,细胞免疫荧光的方法检测eNOS、NF-κB p65蛋白的表达。3、不同浓度(0、4、8、16 mg/dl)的尿酸作用于HRGEC 24小时,利用荧光探针DCFH-DA,在37℃作用于HRGEC 30分钟,倒置荧光显微镜下进行细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)检测。结果:1、与对照组相比较,4 mg/dl尿酸组HRGEC的eNOS mRNA及蛋白的表达无显著性差异(P>0.05),8 mg/dl及16 mg/dl尿酸组HRGEC的eNOS mRNA及蛋白的表达显著减少(P<0.05);与4 mg/dl尿酸组相比较,8 mg/dl及16 mg/dl尿酸组HRGEC的eNOS mRNA及蛋白的表达显著减少(P<0.05)。2、与对照组相比较,4 mg/dl尿酸组HRGEC的ROS表达无显著性差异(P>0.05),8 mg/dl及16mg/dl尿酸组HRGEC的ROS表达显著增多(P<0.05);与4 mg/dl尿酸组相比较,8 mg/dl及16mg/dl尿酸组HRGEC的ROS表达显著增多(P<0.05)。3、与对照组相比较,4 mg/dl尿酸组HRGEC的NF-κB p65 mRNA及蛋白的表达无显著性差异(P>0.05),8 mg/dl及16 mg/dl尿酸组HRGEC的NF-κB p65mRNA及蛋白的表达显著增多(P<0.05);与4 mg/dl尿酸组相比较,8 mg/dl及16 mg/dl尿酸组HRGEC的NF-κB p65 mRNA及蛋白的表达显著增多(P<0.05)。4、与对照组相比较,4 mg/dl尿酸组HRGEC的MCP-1、ICAM-1 mRNA及蛋白的表达无显著性差异(P>0.05),8 mg/dl及16 mg/dl尿酸组HRGEC的MCP-1、ICAM-1 mRNA及蛋白的表达显著增多(P<0.05);与4 mg/dl尿酸组相比较,8 mg/dl及16 mg/dl尿酸组HRGEC的MCP-1、ICAM-1 mRNA及蛋白的表达显著增多(P<0.05)。结论:1、高浓度的尿酸可能通过氧化应激途径导致肾小球内皮细胞损伤,进而造成肾脏功能损伤。2、高浓度的尿酸可能通过激活NF-κB经典炎症信号通路导致肾小球内皮细胞损伤。