【摘 要】
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海带遗传转化模型是以基因枪转化海带雌配子体，转化后诱导生成孤雌生殖孢子体。本文以lacZ报告基因染色结果显示，原有孤雌生殖途径只能实现外源基因的低效率与嵌合式表达。发展
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海带遗传转化模型是以基因枪转化海带雌配子体，转化后诱导生成孤雌生殖孢子体。本文以lacZ报告基因染色结果显示，原有孤雌生殖途径只能实现外源基因的低效率与嵌合式表达。发展了雌（或雄）配子体转化后受精发育生成二倍体孢子体的新途径，均可实现lacZ报告基因的稳定表达。其中，雌配子体途径（转化后与正常雄配子体受精）的结果与孤雌生殖途径相仿，而雄配子体途径（转化后与正常雌配子体完成受精）可大幅提高转化效率与表达效率，有3.5%的植株实现均一性表达，提示外源基因的整合发生在单细胞阶段。沿用原有孤雌生殖途径，转化人乙肝病毒表面抗原（HBsAg）基因，在孤雌生殖孢子体中检测到HBsAg的整合与表达。定量ELISA显示表达水平为0.125-2.497 μg/（mg可溶性蛋白），平均为0.587 μg/（mg可溶性蛋白），即2.25克鲜海带的抗原表达量等同于静脉注射免疫所需15 μg抗原。继而利用雄配子体途径也实现了HBsAg在海带二倍体孢子体中的稳定表达，提示利用海带表达口服乙肝疫苗具有一定可行性。本文结果为大型海藻遗传转化提供了一条可能的新途径，即转化孢子后利用自然的发育过程生成转基因植株；实现了大型海藻中第一个目的基因的导入与表达。
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