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血管紧张素转化酶(Angiotensin I Converting Enzyme,ACE)抑制肽具有降血压的作用,本文以三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)肌肉为研究对象,选择合适的蛋白酶进行水解制备ACE抑制肽。
分析蚌肉营养成分,结果表明蚌肉蛋白质含量较高,达65.1%;氨基酸组成合理,氨基酸评分为74.5;9种组成ACE抑制肽的氨基酸占氨基酸总量的40.39%,适于制备ACE抑制肽。
改进了ACE抑制率的体外检测方法,该方法具有良好的精确性,适用于样品的ACE抑制率的检测。
以ACE抑制率为指标,选用酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶6种蛋白酶,在各种酶的最适条件下水解蚌肉,筛选出胃蛋白酶作为制备ACE抑制肽的最佳用酶。
选用胃蛋白酶水解蚌肉,采用四因素二次通用旋转回归设计,以ACE抑制率和水解度为指标,对胃蛋白酶水解蚌肉的条件进行了优化,得出胃蛋白酶水解蚌肉制备ACE抑制肽的最优条件为:E:S为6%,水解温度34℃,PH值为3,水解时间7h,在此条件下获得水解物的IC<,50>值为0.957mg/mL。同时发现水解度和ACE抑制率之间没有明显的相关性。
采用3000分子量孔径超滤膜对ACE抑制肽进行分离处理,ACE抑制率IC<,50>值降低了25.8%,经以下工艺:河蚌肉原料→采肉→打浆→蛋白酶水解→灭酶→真空浓缩→冷冻干燥→产品,得到的ACE抑制肽冻干粉的收率为11.1%。