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目的:
本研究选用海藻酸钠为载体材料,盐酸表阿霉素为模型药,制备载盐酸表阿霉素海藻酸钠微球,分析表征其一般理化性质特点。通过介入手段将微球输送到模型动物的靶器官,对其体内抗肿瘤作用进行了初步研究,为该微球的进一步开发利用奠定良好的前期实验基础。
方法:
(1)采用乳化凝胶化法制备盐酸表阿霉素海藻酸钠微球,用光学显微镜考察微球的粒径大小及分布,场发射扫描电镜观察微球的表面形态,采用红外光谱法(FT-IR)验证微球的构成,采用体外动态透析法在pH7.4磷酸盐缓冲液释放介质中测定微球的溶胀性及释药性能。同时对微球的粉体学性质、悬浮性及导管推注实验进行考察。
(2)采用超声引导下经皮活检针穿刺种植肿瘤组织条法建立兔VX-2肝癌模型,于不同时间用超声和CT对肿瘤进行监测,对肿瘤种植成功率及模型的生物学特性进行评价。
(3)取肝内种植好的VX-2荷瘤兔40只,随机分成4组,每组10只。股动脉穿刺插管经肝动脉分别给予A组:盐酸表阿霉素海藻酸钠微球(EPI-ALG-MS,100mg/kg);B组:空白海藻酸钠微球(ALG-MS,100mg/kg);C组:盐酸表阿霉素溶液(EPI,5.37mg/kg);D组:不做任何治疗。治疗后,观察各组兔肝功能的变化、肝肿瘤体积的变化、肿瘤坏死程度及生存时间。
结果:
(1)制备的EPI-ALG-MS外观呈圆整球形,平均粒径在(113±22.14)μm,载药量及包封率分别为(5.37±0.24)%和(63.79±5.62)%;红外光谱(FT-IR)表明表阿霉素均匀包载在微球骨架中。药物在体外缓慢释放,12h内呈突释,3d累积释放量达30%。溶胀实验表明海藻酸钠凝胶微球在PH7.4的磷酸缓冲液中,50min左右基本溶胀完全。粉体学性质考察结果符合要求,流动性好,悬浮性好。导管推注实验表明微球不堵塞管道,推注顺利。
(2)种植2周后肿瘤生长迅速,3周时肿瘤直径达到2cm左右,3周后肿瘤内部开始出现坏死。
(3)栓塞术后1d,A、B、C、D组实验兔血清ALT平均水平分别为:(563.22±36.25)U/L、(493.67±19.55)U/L、(430.52±28.19)U/L及(44.98±8.30)U/L;平均血清AST为:(759.31±29.37)U/L、(588.41±35.21)U/L、(531.87±14.79)U/L及(46.26±6.08)U/L;两两比较显示:A、B、C组与D组差异均有统计学意义(P<0.05),其他两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。载药微球组肿瘤坏死率高于其它三组,肿瘤平均坏死率达66.32±1.62%。对照组中位生存时间为18d,肝动脉灌注游离表阿霉素组中位生存时间为22d,空白微球组中位生存时间为29d;载药微球组治疗组中位生存时间为36d,组间比较差异有显著性(P<0.05)。
结论:
用乳化凝胶化法制备的EPI-ALG-MS性质稳定,表征符合要求,工艺简单易行,具有药物缓释性。EPI-ALG-MS是一种有效、低毒的药物缓释新剂型,具有重大开发价值,在局部治疗肝癌方面有良好的临床应用前景。