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现代科学研究表明,免疫牛乳中所含的具有特殊生理功能的免疫球蛋白,可有效地改善和加强人体的免疫因子,通过加强人体自身免疫力,达到预防和治疗作用。因而从免疫牛乳中分离出高纯度、高活性的免疫球蛋白作为食品添加剂,生产具有保健功效的功能性免疫乳制品成为食品界的研究热点。但乳品加工过程中不可避免地要进行灭菌或巴氏杀菌、蒸发浓缩及喷雾干燥等工艺,当免疫球蛋白添加到食品中时就会受到热处理的影响而使其活性降低或丧失。
本课题在免疫牛乳制备及其抗腹泻作用研究等前期工作的基础上,开展了关于免疫牛初乳中免疫球蛋白的分离纯化及免疫球蛋白热保护剂的研究。主要研究成果如下:
1.采用35%硫酸铵一次性盐析、DEAE.Sepharose F.F.离子交换层析和Sephacryl S-200HR凝胶过滤层析法,分离纯化免疫牛初乳中的IgG,并采用SDS-PAGE电泳、单向火箭免疫电泳及试管凝集法对IgG分离物进行了定性定量检测,结果表明所得IgG纯度高,活性大。
2.选用截留分子量为100KD的平板超滤膜从免疫初乳乳清中分离提取IgG,确立了最适操作压力为0.1MPa,最适操作温度为25℃。采用了分段超滤法对免疫牛初乳乳清中的IgG进行分离,使浓缩液中IgG纯度得到进一步提高。
3.研究了蔗糖、葡萄糖、麦芽糖、半乳糖、海藻糖、甘油、木糖和山梨醇等几种糖醇类物质在低浓度(5%、10%、15%)下对牛乳IgG热稳定性的保护作用,结果表明甘油的保护效果最好,海藻糖、麦芽糖的保护效果次之。
4.鉴定了适合于测定牛乳中IgG含量的单向火箭免疫电泳法,该方法操作简便、灵敏度高、耗时短、费用低,适于普遍推广。