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猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2型(porcine circovirus type2, PCV2)所引起的猪的一类表现各异的传染性疾病的总称，该病毒是近年来严重危害养猪生产的重要病原之一，还与其他疾病的发生密切相关。PCV属于圆环病毒科，可分为PCV1和PCV2，PCV1无致病性，PCV2有致病性。PCV2基因组大小约为1.7kb，编码11个阅读框(ORF)，其中ORF1和ORF2是两个主要的阅读框，ORF1编码Rep蛋白，该蛋白与病毒的滚环复制有关，ORF2编码病毒的Cap蛋白，该蛋白是病毒的主要结构蛋白，构成病毒的衣壳，与病毒的免疫机制关系密切。本试验以IPTG诱导表达含pET-28a-ORF2重组质粒的E.coli BL21(DE3)菌株，通过对IPTG浓度、诱导表达温度和时间进行优化，建立猪圆环病毒2型(PCV2) Cap重组蛋白的最佳可溶性表达条件，SDS-PAGE鉴定可溶性表达情况，采用镍离子亲和层析对可溶性表达的Cap蛋白进行纯化。最终确定在OD600值为0.6-1时加入终浓度为1mmol/L的IPTG，37℃诱导4h为最佳的诱导表达条件。在纯化蛋白时，平衡缓冲液、洗涤缓冲液、洗脱缓冲液分别采用咪唑为20mmol/L，50mmol/L，500mmol/L的浓度条件下进行纯化，Westernbloting表明纯化的蛋白有很好的抗原活性。经非还原SDS-PAGE电泳分析纯化的蛋白不仅以单体的形式存在，还以二聚体的形式表现出来。表达纯化过程经过反复试验，建立了一套标准化的表达程序，经计算1L培养物可得到约70mg的蛋白。以纯化的Cap蛋白作为抗原建立了间接ELISA检测方法。为了确定最佳的抗原包被条件和血清稀释度，本研究对可溶性Cap蛋白和血清进行棋盘滴定，抗原包被浓度为2.5μg/mL，血清样品1:400稀释，反应时间为45min，HRP标记的兔抗猪二抗的最佳稀释度为1:1500，反应时间为30min，最佳的显色时间为10min，本研究以X+3SD=0.416的值作为阴性和阳性血清的临界值，经对204份临床血清检测结果表明，本研究建立的方法与IFA的符合率为91.7%；检测的84份临床血清表明，该方法与商品化试剂盒(JBT)的符合率为89.3%。并且与猪繁殖呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪O型口蹄疫病毒(FMDV)阳性血清不发生交叉反应，对临床检测抗体具有重要意义。