口腔扁平苔藓是常见的慢性炎症性皮肤黏膜联发疾病,其病程较长,反复发作,有潜在癌变可能,其发病机制尚不明确,可能是T淋巴细胞介导的自身免疫病。长链非编码RNA是这些年来新发现的一类调控型大分子非编码RNA,参与并调控多种生理功能,在多种疾病包括自身免疫病的发生发展中起着重要作用。最近有学者构建了正常口腔黏膜以及不典型增生口腔黏膜的基因表达系列文库,发现了多个lnc RNA在不典型增生的口腔黏膜中表达异常。因此我们试图构建口腔扁平苔藓的长链非编码RNA表达谱,并初步探讨lnc RNA在口腔扁平苔藓发病中的作用和可能的调控机制。研究目的:1.拟构建口腔扁平苔藓的lnc RNA表达谱,筛选并验证具有表达差异的lnc RNA。2.筛选并验证差异表达的lnc RNA与靶基因之间的作用,以及最终对口腔扁平苔藓发生发展的影响。方法:1.采用表达谱芯片技术构建口腔扁平苔藓患者的lnc RNA表达谱。2.采用定量PCR法验证差异表达的lnc RNA。3.构建候选lnc RNA的慢病毒载体和过表达载体。4.生物信息学预测候选lnc RNA的靶基因。5.分别用慢病毒载体和过表达载体侵染Ha Ca T细胞,采用Real-time PCR和Western Blot检测lnc RNA与靶基因的表达,研究两者间的相互作用。6.双荧光素酶法验证lnc RNA与靶基因的作用。结果:1.构建了口腔扁平苔藓患者的lnc RNA表达谱,并鉴定出2倍以上变化的lnc RNA共180条,其中5倍以上变化的共21条,上调最显著的为ENST00000433410,下调最显著为NR033808.1。定量PCR验证结果与芯片检测结果一致。2.生物信息学预测ENST00000433410的靶基因为CXCR3。3.慢病毒载体侵染Ha Ca T细胞后,ENST00000433410和CXCR3的表达水平均下调;过表达载体Ha Ca T细胞后,ENST00000433410和CXCR3的表达水平均上调,ENST00000433410可能顺式调控CXCR3的表达。4.双荧光素酶法证实ENST00000433410与CXCR3能特异性结合。结论:1.在口腔扁平苔藓患者的lnc RNA表达谱中,ENST00000433410是上调倍数最大的lnc RNA,其靶基因是CXCR3。2.ENST00000433410顺式调控CXCR3,由此可能调控Th1细胞和Th17细胞,诱导Th1细胞迁移,增强Th17细胞的趋化,影响口腔扁平苔藓的发生发展。