柠檬精油抑制酪氨酸酶机理研究及其在纳米乳液中的应用

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柠檬精油具有多种生物活性,如抗氧化、抑菌以及清除自由基等,常作为天然抗氧化剂、防腐剂以及芳香剂应用于食品、香料以及化妆品行业,然而,对于柠檬精油的祛斑功效研究甚少。本文主要研究了柠檬精油抑制酪氨酸酶的机制,并探讨了柠檬精油在纳米乳液中的应用。通过气相色谱-质谱联用(GC/MS)分析方法说明了四种不同产地柠檬精油化学组成相似,均由30多种化合物组成,包括烯萜类、醇类、酯类及醛类化合物;其中D-柠檬烯为主要成分,含量高于60%,其余化合物含量均低于15%。采用酪氨酸酶抑制、清除自由基(DPPH)、螯合铜离子以及Lineweaver-Burk双倒数作图法研究了柠檬精油、柠檬醛、乙位蒎烯、甲酸香叶酯、乙酸橙花酯、莰烯、D-柠檬烯抑制酪氨酸酶能力及机制;酪氨酸酶抑制实验表明了柠檬精油随着浓度和时间增加,抑制能力增加,六种化合物均对酪氨酸酶有抑制作用且在柠檬精油抑制过程中产生协同抑制;清除自由基实验显示了柠檬精油和六种化合物有良好的抗氧化性,均可通过降低酶反应体系中氧自由基数达到抑制酶活效果;螯合铜离子实验从结构上分析了六种化合物与铜离子不发生螯合作用,不与底物竞争性夺取酶活性部位,可能利用分子空间位阻效应阻止底物与酶接触从而产生抑制效果;Lineweaver—Burk双倒曲线揭示了柠檬精油是一种非竞争性抑制剂。利用高压均质法制备了含柠檬精油的纳米乳液;通过绘制三元相图得到了Tween 80:Span 80为3:2,柠檬精油:霍霍巴油为3:2;单因素实验结果表明了当混合乳化剂含量1.5%,混合油脂含量3%,均质压强60 Mpa,均质次数4次时所制备的纳米乳液为最优配方,粒径约为120 nm, PDI约为0.2;Franz扩散池透皮实验比较了含柠檬精油纳米乳液和普通的渗透性,结果显示纳米乳液既能促进柠檬精油的渗透,又能增强柠檬精油存储稳定性。
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