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本研究以工厂化养殖的半滑舌鳎和牙鲆为研究对象，运用组织学切片、电镜观察、同源克隆和cDNA末端快速扩增、荧光实时定量、放射免疫测定等方法，对亲鱼卵巢的周期发育情况、卵母细胞的发育特点、膜孕激素受体和新型膜孕激素受体基因的cDNA全长克隆和时空表达特征、性类固醇激素在繁殖周期和全年中的变化规律等进行了研究。初步了解卵巢和卵母细胞不同发育阶段的结构特征、性类固醇激素生理作用、两种膜孕激素受体基因的生理功能，为提高鲆鲽类的人工繁殖技术提供了理论依据。相关的研究结果如下：1.运用组织学方法和透射电镜观察方法，对性成熟半滑舌鳎卵巢和采集到的卵母细胞发育特征进行观察，发现卵巢发育可分为5个期，卵母细胞的生长发育过程可分为5个时相。初步判断：200-500um卵母细胞为Ⅲ时相卵母细胞，500-800um卵母细胞为Ⅳ时相卵母细胞，800-1000um卵母细胞为Ⅴ时相卵母细胞，1000-1200um卵母细胞为游离在卵巢腔中的卵母细胞。在200-300um卵母细胞的滤泡细胞外层能看见毛细血管，并且在滤泡细胞外包被着一层表面上皮，在胞质中分布着大量的线粒体；在300-400um卵母细胞中发现了皮质液泡、粗面内质网、高尔基体和溶酶体等细胞器；在400-500um卵母细胞中发现卵黄颗粒，卵膜附近出现高电子密度的物质；在500-600卵母细胞中致密的卵黄颗粒上有透明的平行条纹，并且卵黄颗粒之间有大量的线粒体聚集；在600-700um卵母细胞中发现孔道明显变短、数量减少；在700-800um卵母细胞中发现卵黄颗粒附近有比较发达的粗面内质网；在800-900um卵母细胞中发现胞质中充满卵黄颗粒，并且卵黄颗粒有相互融合的现象。2.采用同源克隆和末端快速扩增方法，首次从半滑舌鳎卵巢中克隆了膜孕激素受体α（mPRα）的cDNA序列，全长为1319bp；将推断的氨基酸序列与其它物种mPRα氨基酸序列进行多重比较分析，发现存在7个跨膜区域。聚类分析和序列相似度分析表明：半滑舌鳎mPRα与漠斑牙鲆、大西洋绒须石首鱼以及青鳉等鱼类的mPRα聚为一支，亲缘关系较近，相似度较高，分别为94%、93%和90%；而与高等哺乳动物人和牛相似性均为53%，亲缘关系较远。采用荧光实时定量RT-PCR技术分析了mPRα mRNA在性成熟雌性半滑舌鳎不同组织的表达，结果表明：mPRα组织表达具有广泛性，但表达量存在差异，在脑、卵巢和垂体等组织中表达丰富，而在肝脏、肌肉、胃、肠和肾脏等组织中表达较弱。对繁殖周期中，脑、垂体和卵巢的mPRα表达水平的变化进行分析，结果显示： mPRα的周期表达水平，在脑和垂体组织中，当卵巢发育至Ⅳ期时表达量最高；在卵巢组织中，mPRα的周期表达水平在卵巢发育至Ⅴ期时表达量最高。3.采用同源克隆和末端快速扩增方法，首次从半滑舌鳎卵巢中克隆得到新型膜孕激素受体（mPRL）的cDNA序列，全长为2002bp。构建了14个物种的mPR家族成员氨基酸序列系统进化树，包括硬骨鱼类和哺乳类，发现此进化树共分为3大分支，分别为mPRα分支、mPRL分支、mPRβ分支，半滑舌鳎mPRL基因属于硬骨鱼类mPR家族新基因分支。序列相似度分析表明：半滑舌鳎mPRL氨基酸序列与青鳉的同源性为68%，与三刺棘鱼同源性为72%。应用实时荧光定量RT-PCR技术分析了mPRL mRNA在性成熟雌性半滑舌鳎不同组织的表达，结果表明：mPRL组织表达具有广泛性，但表达量存在差异，在卵巢、心脏、鳃和脑等组织中表达丰富，而在肾脏、肝脏和头肾等组织中表达较弱。对繁殖周期中，脑、垂体和卵巢的mPRL表达水平的变化进行分析，结果显示：mPRL的周期表达水平，在脑和卵巢组织中，当卵巢发育至Ⅴ期时表达量最高；在垂体组织中，虽然mPRL的周期表达水平在卵巢发育的不同时期变化不大，但是当卵巢发育至Ⅴ期时表达量显著高于其他繁殖期(P<0.05)。4.应用实时荧光定量RT-PCR技术分析了性成熟雌性牙鲆的膜孕激素受体（mPRα）基因和新型膜孕激素受体（mPRL）基因的mRNA在不同组织的表达情况，结果表明：mPRα和mPRL在牙鲆雌鱼的所有组织中都表达，只是各自在不同的组织中的表达量存在差异。mPRα在牙鲆的脑、垂体、卵巢和鳃等组织中表达丰富，在头肾、肾脏、胃和肠等组织中表达较弱；而mPRL在牙鲆的卵巢、心脏、鳃和脑等组织中表达丰富，在其他组织中表达量相对较低。对繁殖周期内，脑、垂体和卵巢的mPRα基因和mPRL基因的周期表达水平的变化进行分析，结果显示：mPRα在脑、垂体和卵巢中的表达规律不相同，在脑和垂体组织中，当卵巢发育至Ⅳ期时mPRα表达量最高；而在卵巢组织中，当卵巢发育至Ⅴ期时mPRα表达量最高。而mPRL在脑、垂体和卵巢中的表达规律相同，都是当卵巢发育至Ⅴ期时达到高峰值。研究发现：牙鲆中，mPRα基因和mPRL基因在脑、垂体和卵巢组织中的时空表达规律与分别半滑舌鳎中mPRα基因和mPRL基因在脑、垂体和卵巢组织中的时空表达规律相似。5.对达到性成熟年龄的半滑舌鳎和牙鲆血浆中雌二醇和孕酮在繁殖周期中的含量变化规律与卵巢成熟和基因表达水平变化规律分析，结果显示：雌二醇在卵黄生成期含量增加，并在卵母细胞成熟前达到最高峰值；而孕酮含量的高峰期比雌二醇的晚些，是在卵母细胞成熟和排卵的时达到高峰值。半滑舌鳎和牙鲆的血浆中雌二醇和孕酮含量的周期变化趋势与各自的mPRα基因和mPRL基因mRNA在雌性半滑舌鳎脑、垂体和性腺中的周期表达变化趋势相符合，表明雌二醇和孕酮通过两种膜孕激素受体影响鱼类卵巢发育、成熟。