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mRNA定位是一种基因转录后水平上的重要调控机制,其对细胞的生理活动和分化发育都有着极其重要的作用。在芽殖酵母有丝分裂中,ASH1mRNA在子细胞芽尖因不对称定位并且表达抑制了子细胞交配类型的转换,母细胞发生交配类型转换。ASH1 mRNA的传送和定位机制在分子水平上已获得了充分的认识,但是在其定位后的翻译调控和降解机制还未得到充分的研究。过去有报道称,酵母细胞中不与核糖体结合或不在翻译状态下的mRNA会马上被降解。最近有研究揭示,细胞内处于沉默状态的mRNA可以被暂时的储存在称为处理小体的转化灶内(Processing bodies,P-bodies)。一旦需要,mRNA可以从处理小体内释放激活,反之,储存的mRNA将会在处理小体内降解。 我们用细胞内同源重组的方法敲除酵母细胞处理小体内的关键基因DHH1,在基因缺失的菌株用Western blot检测细胞内Ash1p的表达量的变化,RT-PCR检测基因缺失细胞内ASH1 mRNA的稳定性,同时用免疫共沉淀的方法证实ASH1 mRNA与处理小体构成蛋白Dhh1p结合。然后我们构建质粒Y33-DHH1-GFP,将质粒转化到野生型菌株,同时做原位杂交证明ASH1 mRNA是否存在于处理小体内。我们的实验结果证明了ASH1 mRNA与处理小体蛋白Dhh1p结合,DHH1基因敲除影响细胞内ASH1 mRNA的定位表达和稳定性。从而为处理小体在ASH1 mRNA的定位、翻译、运输及转录后调控等方面重要作用的研究提供实验基础。这些结果指出了ASH1 mRNA定位运输和表达之间相应调节机制。