霍山黄大茶化学成分研究

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茶叶是山茶科(Theaceae)山茶属(Camellia sinensis L.)植物茶的芽叶。霍山黄大茶是我国特有的茶叶品种,为五大发酵茶之一的轻发酵茶,国内外的研究结果表明相较于其他种类的茶叶,黄茶具有更加良好的降血糖效果[1-4]。本研究基于此对霍山黄大茶进行了化学成分的系统分离,以期找到具有良好活性作用的单体化合物;并利用UPLC-DAD法测定了黄大茶中五种儿茶素类以及咖啡因的含量并优化了提取工艺。目的:通过对霍山黄大茶分离,寻找具有研究价值的活性单体。建立同时测定霍山黄大茶中5种儿茶素类成分及咖啡因的UPLC定量分析方法方法:黄大茶经乙酸乙酯,乙醇依次超声提取后,利用正相硅胶、凝胶、MCI、ODS、HP20SS等分离材料,结合高效液相制备色谱(Pre-HPLC)等分离技术和手段,对乙酸乙酯部位和乙醇部位进行分离、纯化,利用核磁共振技术对单体化合物的结构进行鉴定;利用3T3-L1脂肪细胞体外模型对部分单体化合物进行降血糖活性的筛选;利用UPLC-DAD测定霍山黄大茶中的五种儿茶素及咖啡因的含量。结果:共分离的到化合物19个,分别为:槲皮素(1),山柰酚(2),(2S)-1-O-亚麻酰基-3-O-β-D-吡喃半乳糖甘油(3),咖啡因(4),山柰酚3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(5),山柰酚3-O-β-D-芸香糖苷(6),槲皮素3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(7),芹菜素-6-C-β-D-吡喃葡萄糖苷(8),山柰酚3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(9),山柰酚3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(10),没食子酸(11),EGCG(12),杨梅素-3-β-D-葡萄糖苷(13),杨梅素(14),GC(15),EGC(16),C(17),EC(18)和芸香苷(19)。化合物1,2,4-6,12,15-18均没有在体外细胞实验中展现出降血糖效果。测定了霍山黄大茶中五种儿茶素和咖啡因的含量,EC、ECG、咖啡因、EGC、EGCG和GC在相应范围内线性关系良好(r>0.9995),并优化了黄大茶提取的最佳条件。结论:细胞实验结果显示,化合物1,2,4-6,12,15-18都没有明显促进脂肪细胞摄取葡萄糖的活性,利用UPLC-DAD测定霍山黄大茶中的五种儿茶素及咖啡因的含量方便可行。
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